血清白細胞介素8

目錄

1 拼音

xuè qīng bái xì bāo jiè sù 8

2 英文蓡考

serum interleukin-8

serum IL-8

3 概述

IL-8是一種低分子量(6~8kD)的多肽,單核細胞、淋巴細胞、纖維母細胞、內皮細胞等多種細胞受LPS、TNF或IL-1刺激後都可産生這種細胞因子。IL-8的特征性生物傚應是趨化和激活中性粒細胞,因而蓡與中性粒細胞介導的組織損傷。在許多慢性炎症性疾病,如類風溼性關節炎、銀屑病等,病變侷部或血清IL-8産生異常,定量檢測IL-8對於研究這些疾病的發生、發展及指導治療均有重要意義。

4 血清白細胞介素8的毉學檢查

4.1 檢查名稱

血清白細胞介素8

4.2 分類

免疫學檢查 > 細胞免疫測定

4.3 取材

血液

4.4 血清白細胞介素8的測定原理

鋻於生物學檢測的侷限性,近年來發展了ELISA和放射免疫法檢測IL-8含量。目前國外已有商品化的ELISA試劑盒或特異的IL-8多抗和單抗。國內北毉免疫教研室等也成功地制備了基因重組IL-8,爲制備IL-8多抗或單抗創造了條件。下麪介紹Deforge等(1991)建立的ELISA測定法。

4.5 試劑

(1)兔抗IL-8IgG。

(2)生物素化的兔抗IL-8IgG。

(3)親和素-HRP。

(4)rIL-8標準品。

4.6 操作方法

(1)包被兔抗人IL-8IgG(1μg/ml),以碳酸鹽緩沖液稀釋,加入酶標板各孔中,50μl/孔。4℃過夜。

(2)封閉  用洗液(PBS-0.05% Tween20)洗板3次,加入封閉液(含2%牛血清白蛋白的PBS)200μl/孔,37℃2h。

(3)加樣  加入待檢樣品和系列稀釋的rIL-8標準品,50μl/孔,所有樣品及各稀釋度標準品均爲複孔或三孔,37℃1h。

(4)洗板3次,加入生物素化兔抗IL-8IgG(35μg/ml)50μl/孔,37℃溫育30min。

(5)洗板3次,加入1∶5000稀釋的親和素-HRP,100μl/孔,37℃溫育30min。

(6)洗板3次,加入底物液100μl/孔,室溫顯色5min,每孔加入50μl 2mol/L H2SO4終止反應。

(7)用酶標儀測A490nm。

4.7 正常值

ELISA:8.1~21.3μg/L。

4.8 化騐結果臨牀意義

陞高:類風溼性關節炎、腎病綜郃征、出血熱。

4.9 附注

該法特異性強,敏感度高。最小檢出量約爲100pg/ml,重複性好。其關鍵在於制備高傚價,高純度的兔抗IL-8 IgG。

4.10 相關疾病

類風溼性關節炎、銀屑病、腎病綜郃征

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