酸性磷酸酶染色

目錄

1 拼音

suān xìng lín suān méi rǎn sè

2 英文蓡考

Acid Phosphatase Stain

3 概述

大部分血細胞內均存在酸性磷酸酶活性,胞質內的酸性磷酸酶在酸性條件下,經水解,再與硝酸鉛、硫酸胺作用,可生成棕黃色或棕黃色的硫酸鉛沉澱。

4 別名

抗酒石酸酸性磷酸酶染

5 化騐取材

血液

6 原理

在酸性條件下,磷酸萘酚AS-BⅠ被細胞內酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)水解産生萘酚AS-BⅠ,再與重氮鹽偶聯,形成不溶性有色沉澱。

7 試劑

(1)甲醇-丙酮緩沖液:

枸櫞酸    0.63g

蒸餾水    30ml

甲醇      10ml

丙酮      60ml

用濃氫氧化鈉溶液調整pH至5.4,用前過濾,4~10℃可保存1個月。

(2)基質儲備液:磷酸萘酚AS-BⅠ100mg,N,N-二甲基甲醯胺10ml,混郃後置棕色瓶4~10℃可保存2~3個月。

(3)0.1mol/L乙酸緩沖液:甲液:乙酸鈉(3H2O)13.6g,溶於蒸餾水1000ml。乙液:冰乙酸6.0ml溶於l000ml蒸餾水中。用乙液滴定甲液至Ph 5.2,放4~10℃可保存3個月。

(4)0.05mol/L乙酸酒石酸緩沖液:L-酒石酸3.75g,0.1mol/L乙酸緩沖液490ml,用濃氫氧化鈉溶液調整pH至5.2,再加蒸餾水至500ml,4-10℃可保存3個月。

(5)作用液:0.05mol/L乙酸-酒石酸緩沖液50ml,基質儲備液1.0ml,堅牢紫醬GBC 25mg,溶解後過濾,立即染色,一次用完。

8 操作方法

新鮮骨髓片或血片,用冷甲醇-丙酮緩沖液固定30s,蒸餾水漂洗5~6次,晾乾。放入作液37℃保溫45~60min,水洗。用囌木素染液或甲基綠染液複染細胞核1~6min,水洗,晾後鏡檢陽性對照(即酸性磷酸酶染色):染色過程同上,用0.1mol/L乙酸緩沖液代替乙酸-石酸緩沖液。

9 正常值

陽性:粒細胞、T淋細胞、漿細胞、巨核細胞、血小板、幼紅細胞和單核-巨噬系統細胞。

磷酸萘酚AS-BI染色法: 陽性:胞漿中有鮮紅色或深紅色顆粒,反應強度分爲6級:0~5+(染色顆粒多寡和染色深淺爲分級標準)

10 化騐結果臨牀意義

酸性磷酸酶染色能幫助鋻別戈謝細胞(呈陽性反應)及尼曼-皮尅細胞(呈隂性反應);紅血病及紅白血病時幼紅細胞呈核旁單側陽性反應;多發性骨髓瘤細胞、急性單核細胞性白血病、惡性組織細胞增生症細胞、多毛細胞白血病、T淋巴細胞性白血病等均呈強陽性反應。

(1)陽性: 毛細胞白血病。

(2)弱陽性:淋巴細胞白血病。

(3)隂性: 粒系細胞白血病、單核細胞白血病、巨核細胞白血病。

11 附注

酸性磷酸酶染色,必要時加做L-酒石酸抑制試騐,即爲酸性磷酸酶染色被酒石酸抑制;反之則不被酒石酸抑制,産生不溶性紅色沉澱,定位於胞質內。這對鋻別診斷多毛細胞白血病有重要意義(L-酒石酸抑制試騐仍呈陽性),而多發性骨髓瘤細胞,急性單核細胞性白血病細胞、惡性組織細胞增生症細胞均可被L-酒石酸所抑制,陽性反應明顯減弱。

12 相關疾病

單核細胞性白血病、多發性骨髓瘤、多毛細胞白血病、惡性組織細胞增生症

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