3 概述
兒茶酚胺是由腎上腺髓質,腎上腺神經元及腎上腺外嗜鉻體分泌的激素,包括腎上腺素、去甲腎上腺上腺上腺素、多巴胺和多巴。但腎上腺髓質只釋放腎上腺素與去甲腎上腺上腺上腺素,且以腎上腺素爲主。作爲激素釋放的腎上腺素和去甲腎上腺上腺上腺素具有交感神經興奮心血管及促進能量代謝、升高血糖等作用。測定尿兒茶酚胺對診斷嗜鉻細胞瘤很有價值。留取24h尿液,以濃鹽酸5~10ml作防腐劑,取10ml送檢。
5 兒茶酚胺的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 化驗取材
5.4 兒茶酚胺的測定原理
將樣品校至pH值8.0~8.5時其中的兒茶酚胺經氧化鋁吸附,再用酸性溶液洗脫,然後在pH值6.0~6.5的緩衝溶液中被高鐵氰化鉀溶液氧化生成腎上腺素紅,再以鹼性抗壞血酸溶液還原使成熒光物質,進行熒光測定而定量。
5.5 試劑
(5)0.2mol/L乙酸。
(6)0.2mol/L乙酸鈉。
(7)1mol/L氨水。
(9)0.2%鹼性抗壞血酸溶液,取5mol/L氫氧化鈉9份與2%抗壞血酸溶液1份混合而成,臨用前配製。
(10)0.25%高鐵氰化鉀。
(11)正丁醇,需重蒸餾後使用。
(12)0.4mg/L硫酸奎寧溶液,準確稱取硫酸奎寧4mg,溶於0.05mol/L硫酸溶液100ml中,置冰箱貯存。取此貯存液1ml於100ml容量瓶中,以0.05mol/L硫酸溶液加至刻度,此爲應用液,置冰箱備用。
(13)活性氧化鋁(100目),將氧化鋁200g放入,2mol/L鹽酸溶液1000ml中,加熱煮沸20~30min,同時不斷攪拌,然後用水反覆洗滌,至上清液的pH值呈中性。抽氣濾幹後置烤箱中,在約300℃時活化3h備用。
(14)0.4mg/L去甲腎上腺上腺上腺素標準應用液,精確稱取去甲腎上腺上腺上腺素酒石酸鹽10mg,溶於0.1mol/L鹽酸中使成100ml。此即爲貯存液,置冰箱可保存數月。臨用前取貯存液0.4ml於100ml容量瓶中,以0.2mol/L乙酸溶液稀釋至刻度。
5.6 操作方法
(1)收集24h尿液:集尿瓶中預加濃鹽酸5ml作防腐劑,記下尿液總量。
(2)水解:將尿液50ml置於100ml三角瓶中,加稀硫酸調節pH值至2.0。將尿樣煮沸1min,用冷水冷卻。
(3)吸附與洗脫:上述三角瓶中加入活性氧化鋁3g,用5mol/L氫氧化鈉粗調pH值至近中性,再用0.5mol/L氫氧化鈉細調pH值至8.2~8.4,搖勻5min。靜置2min後,傾去上層清液。然後將瓶內氧化鋁混懸液傾入柱層析管中(管底填有玻璃絲或砂心,管徑10mm)。濾幹後,以0.2mol/L乙酸鈉溶液10ml左右清洗1次、重蒸水洗2次,每次2ml左右。濾幹後,用0.2mol/L乙酸溶液50ml左右進行洗脫,收集洗脫液,測定體積後用洗脫液加至50ml。
(4)正丁醇處理:加正丁醇20ml至上述洗脫液中,倒轉振搖2min。靜置片刻待溶液澄清後,吸去上面正丁醇,得澄清洗脫液。
(5)取15×150mm試管3支標明測定管(U)、標準管(S)和空白管(B),然後按下表(表1)進行操作:
5.7 正常值
高效液相色譜法:<650nmol/24h。
熒光分析法:<1655nmol/24h。
5.8 化驗結果臨牀意義
降低:見於帕金森病、癲癇、腎上腺切除後、風溼熱、營養不良等。
升高:見於嗜鉻細胞瘤、神經母細胞瘤、腦梗死、重症肌無力、進行性肌營養不良、低血糖、心肌梗死、躁狂性精神病等。
5.9 附註
(1)使用維生素C、維生素B2、氯丙嗪、氨苄西林、腎上腺素、水合氯醛、甲基多巴、四環素、地西泮、咖啡因、利血平、哌替啶和抗高血壓藥等可影響測定結果。
(2)若用熒光分析法,受檢者應在試驗前3天禁食含熒光反應的物品,如茶、咖啡、巧克力、茄子、番茄、香蕉、檸檬汁等。
(3)劇烈運動後,精神高度緊張者測定結果可升高。