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載脂蛋白B

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1 拼音

zǎi zhī dàn bái B

2 英文參考

APOB

apolipoprotein B

3 概述

載脂蛋白是血漿脂蛋白部分,各類脂蛋白中均含有一種或幾種不同特異性載脂蛋白。目前已經發現的載脂蛋白有20余種。ApoB是其中的一種。

4 載脂蛋白B的別名

APOB

5 載脂蛋白B醫學檢查

5.1 檢查名稱

載脂蛋白B

5.2 分類

血液生化檢查/脂類測定

5.3 化驗取材

血液

5.4 原理

載脂蛋白B的原理是抗原抗體按一定比例反應時,在溶液內生成細小顆粒的抗原抗體復合物均勻分散在溶液介質內。當光線通過這一渾濁液時,渾濁液內的顆粒能吸收光線,光線被吸收的量與渾濁顆粒的量呈正比,血清ApoA1或ApoB與相應的抗體結合,在一定條件下形成不溶性免疫復合物,使溶液渾濁,即濁度與吸光度成正比。

5.5 試劑

(1)巴比妥緩沖液離子強度0.05,pH8.6。

(2)10g/L瓊脂糖(標準電內滲)用巴比妥緩沖液配制,加熱溶化,混合后,分裝10ml/管,冷后4℃貯存。

(3)0.15mol/L NaCl溶液。

(4)兔(或羊)抗人apoA Ⅰ抗血清效價不低于1∶16)及apoB抗血清(效價不低于1∶32)。

(5)校準血清(同比濁法)。

(6)染色液:考馬斯亮藍R-250 0.25g溶于甲醇45ml中,加入冰醋酸10ml及水45ml,混合,溶后備用。

(7)脫色液:每升含冰醋酸50ml及甘油100ml。

5.6 操作方法

(1)澆板:每板用10g/L瓊脂糖10ml,沸水浴中融化,混勻,冷至50~55℃時加入apoA Ⅰ抗血清50μl,apoB抗血清8μl(用量視抗血清效價而定),迅速混勻后倒在預置在水平臺上的玻璃板上,冷后放在4℃,20min后打孔,孔在板的陰極端,孔徑3mm,孔間距至少5mm,孔容量5μl。把板放入電泳槽,用

濾紙搭橋

(2)稀釋抗原:用0.15mol/L NaCl液將校準血清稀釋成1∶100,1∶150,1∶200,1∶300,及1∶400(作校準曲線之用),血清標本按1∶200稀釋,放4℃冰箱不得超過3天。

(3)加樣:在低電流狀態(10mA/板)將稀釋好的定值血清及標本分別吸取5μl(準確),加入瓊脂糖凝膠加樣孔內。每板都要做一系列標準。

(4)通電:穩流24mA/板,端電壓6~8V/cm,以流水冷卻使瓊脂糖保持15℃,電泳3~4h。

(5)脫雜蛋白及制干膠膜:電泳后的瓊脂糖板浸泡在0.15mol/L NaCl中30min,將膠膜托置于聚酯薄膜上,用多層濾紙在輕輕加壓下吸干膠內水分然后將濾紙、膠膜與聚酯膜三者一起自然干燥,或用熱吹風器吹干,干后膠膜會自然與濾紙及聚酯膜分開。

(6)染色:將瓊脂糖膠膜平鋪浸泡于染色液內20~30min。

(7)脫色:用脫色液浸泡已染色的膠膜至火箭峰清晰,背景基本無色。可在水中用兩片玻璃紙將膠膜夾住,晾干后可長期保存。也可以用流水浸泡脫色至背景干凈。

5.7 正常值

ApoA1:1.00~1.50g/L;ApoB:0.50~1.10g/L。

5.8 化驗結果臨床意義

ApoA1水平與高脂血癥冠心病呈負相關。ApoB水平與高脂血癥及動脈硬化性疾病呈正相關。

5.9 附注

(1)購買效價高、單價特異的ApoA1、ApoB抗血清。

(2)為了準確測定ApoA1、ApoB,必須做標準曲線。

(3)免疫透射比濁應以多點定標。按曲線回歸運算。

5.10 相關疾病

高脂血癥

血漿脂蛋白

相關文獻

開放分類:血液生化檢查脂類測定化驗及醫學檢查
詞條載脂蛋白Bbanlang创建
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參與討論
  • 評論總管
    2019/10/16 2:15:54 | #0
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