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芽生菌補體結合試驗

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1 拼音

yá shēng jūn bǔ tǐ jié hé shì yàn

2 概述

芽生菌屬一種病原性真菌。世界各地都有,主要分布北美洲、美國東部,最近非洲大陸及以色列也相繼發生本菌感染報道。早些時候在英國、蘇聯、法國都有報道。我國也曾有類似報道,但未作最后培養鑒定

3 芽生菌補體結合試驗的醫學檢查

3.1 檢查名稱

芽生菌補體結合試驗

3.2 分類

血清檢查 > 補體結合試驗

3.3 芽生菌補體結合試驗的測定原理

補體結合試驗法:抗原抗體復合物可以結合補體,這是補體結合試驗的依據。綿羊紅細胞和其相應抗體(溶血素)的復合物結合補體后出現溶血現象。因此,綿羊紅細胞和溶血素被作為補體結合試驗中判斷待測系統中有無抗原抗體反應的復合物系統。如待測系統產生抗原抗體復合物,則可結合一定量補體,此時加入溶血系統則不出現溶血。如待測系統中只有抗原或抗體,不能結合補體,加入溶血系統則與游離補體結合而發生溶血,這就是補體結合試驗的基本原理。

3.4 試劑

(1)巴比妥緩沖液(BBS):稱取氯化鈉85.0g,氯化鎂六水合物1.68g,氯化鈣0.28g,巴比妥5.75g,巴比妥鈉2.0g,先將巴比妥加入500ml水中加熱溶解后,再加其他成分,補加水至2000ml,此為保留液,用時稀釋5倍。

(2)抗體(溶血素):應無抗補體現象,國內有商品供應。

(3)2%羊紅細胞:用生理鹽水離心洗滌后,用BBS配成2%懸液。

(4)補體:豚鼠血清。

3.5 操作方法

(1)補體和溶血素的滴定

①取補體1ml,加BBS 9ml,依次稀釋成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同時取50%的溶血素0.2ml,加BBS 9.8ml,即為1∶100的溶血素,然后繼續稀釋成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400。

②采取方陣排列試管,縱行各管加不同濃度的補體0.1ml,橫排各管加溶血素0.1ml(皆應從最高稀釋度加起)混勻后,各管加BBS 0.2ml,補體和溶血素對照管各加BBS0.3ml,最后在各管中加2%羊紅細胞0.1ml。各管總量為0.5ml,搖勻,放37℃水箱中30min,觀察結果。茲舉一例說明(表1):

以完全溶血的補體和溶血素最高稀釋度為各自的單位。上表(表1)中溶血素1∶3200為一個溶血素單位,補體1∶80為一個補體單位。在實際應用時,溶血素用2u(3200÷2=1600),補體用2.5u(80÷2.5=32)。

(2)正式試驗:

①用V型微量反應板操作,每份標本作一個試驗孔,一個血清對照孔。各孔內先加BBS 0.025ml。

②用稀釋棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋轉后移入第二孔,共八孔,如此可得1∶2~1∶256稀釋。

③按下表(表2))加入各試劑:

(3)結果判斷:凡對照組各管的結果應符合以下情況,否則應重做。

補體對照管:2.5u=0,1u=0~±,0.5u=3~4。羊紅細胞對照管:4。抗體對照管:0。陰性對照管;1∶2~1∶256=0。陽性對照管:同一份陽性血清,每次結果應一致。

當各測定管反應最強一管仍為±報告可疑,1~4報告陽性。如測定管和血清對照管均抗補體,全部測定管皆為0,報告陰性。

檢查抗體的方法與檢查抗原的方法一樣,只是改用4個單位已知抗原,藉以測定被檢血清。

3.6 正常值

陰性(<1∶4)。

3.7 化驗結果臨床意義

陽性(滴度升高):芽生菌、球孢子菌、組織胞漿菌感染。

3.8 附注

該試驗操作復雜,多被其他方法而取代。

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開放分類:化驗及醫學檢查血清學檢查補體結合試驗
詞條芽生菌補體結合試驗banlang创建
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  • 評論總管
    2019/3/20 21:45:13 | #0
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本頁最后修訂于 2013年2月22日 星期五 18:03:19 (GMT+08:00)
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