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藥材及成方制劑顯微鑒別法

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1 拼音

yào cái jí chéng fāng zhì jì xiǎn wēi jiàn bié fǎ

顯微鑒別系指用顯微鏡藥材切片、粉末、解離組織表面制片成方制劑中藥味的組織、細胞或內含物等特征進行鑒別的一種方法。鑒別時選擇有代表性的樣品,根據各該藥材鑒別項的規定制片。成方制劑根據不同劑型適當處理后制片。

一、橫切片或縱切片:選取藥材適當部位,軟化后用徒手或滑走切片法,切成10~20μm的薄片,選用甘油醋酸試液水合氯醛試液或其它試液處理后觀察。必要時可包埋后切片。

二、粉末制片:取粉末少量,置載玻片上,攤平,選用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它適當試液處理后觀察。

三、表面制片:將樣品濕潤軟化后,切取一部分或撕取其表皮,加適宜的試液觀察。

四、解離組織片:如樣品中薄壁組織占大部分,木化組織少或分散存在,可用氫氧化鉀法;如果品堅硬,木化組織較多或集成較大群束,可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。在解離前,應先將樣品切成寬或厚約2mm的小條或片。

1.氫氧化鉀法

置樣品于試管中,加5%氫氧化鉀溶液適量,加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止,傾去堿液,加水洗滌后,取出少量置載玻片上,用解剖針撕開,以稀甘油裝置觀察。

2.硝鉻酸法

置樣品于試管中,加硝鉻酸試液適量,放置,至用玻璃棒擠壓能離散為止,傾去酸液,加水洗滌后,照1.法操作裝置。

3.氯酸鉀法

置樣品于試管中,加硝酸溶液(1→2)及氯酸鉀少量,緩緩加熱,待產生的氣泡漸少時,再及時加入氯酸鉀少量,以維持氣泡穩定發生,至用玻璃棒擠壓能離散為止,傾去酸液,加水洗滌后,照1.法操作裝置。

五、花粉粒與孢子制片:取花粉、花藥(或小的花朵)或孢子囊群(干燥樣品浸于冰醋酸中軟化),用玻璃棒搗碎,過濾離心管中,離心,取沉淀加新鮮配制的醋酐與硫酸(9∶1)的混合液1~3ml,置水浴上加熱2~3分鐘,離心,取沉淀,用水洗滌2次,加50%甘油與1%苯酚3~4滴,用品紅甘油膠封藏觀察。也可用水合氯醛試液裝置觀察。

六、細胞及細胞內含物等的測量:在顯微鏡下測量細胞及細胞內含物等的大小,可用目鏡測微尺測量。先將目鏡測微尺裝入目鏡內,用鏡臺測微尺標化。標化時,轉動目鏡,移動鏡臺測微尺,使兩種量尺的刻度平行,左邊的“0” 刻度重合,再找第二條重合刻度。根據兩條重合刻度間兩種量尺的小格數,計算出目鏡測微尺每小格在該物鏡條件下所相當的大小(μm)。測量時,以目鏡測微尺測量目的物的小格數,乘以每一小格的大小(μm)。通常是在高倍物鏡下進行,但欲測量較長的如纖維、非腺毛等的長度時,則以在低倍物鏡下測量較為方便。記錄最大值與最小值(μm),可允許有少量略高或略低于藥典規定的數值

七、細胞壁性質的檢定:

1.木質化細胞壁

間苯三酚試液1~2滴,稍放置,加鹽酸1滴,因木化程度不同,顯紅色或紫紅色。

2.木栓化或角質化細胞壁

加蘇丹Ⅲ試液,稍放置或微熱,顯橘紅色至紅色。

3.纖維素細胞壁

氯化鋅碘試液;或先加碘試液濕潤后,稍放置,再加硫酸溶液(33→50);顯藍色或紫色。

4.硅質化細胞壁

加硫酸無變化。

八、細胞內含物性質的檢定:

1.淀粉

(1)加碘試液,顯藍色或紫色。

(2)用甘油醋酸試液裝置,置偏光顯微鏡下觀察,未糊化的淀粉粒顯偏光現象;已糊化的無偏光現象。

2.糊粉粒

(1)加碘試液,顯棕色或黃棕色。

(2)加硝酸汞試液,顯磚紅色。材料中如含有多量脂肪油,宜先用乙醚石油醚脫脂后進行試驗。

3.脂肪油、揮發油樹脂(1)加蘇丹Ⅲ試液,顯橘紅色、紅色或紫紅色。

(2)加90%乙醇,脂肪油不溶解(篦麻油巴豆油例外),揮發油則溶解。

4.菊糖

加10%α-萘酚乙醇溶液,再加硫酸,顯紫紅色并很快溶解。

5.粘液

加釕紅試液,顯紅色。

6.草酸結晶(1)加稀醋酸不溶解,加稀鹽酸溶解而無氣泡發生。

(2)加硫酸溶液(1→2),逐漸溶解,片刻后析出針硫酸鈣結晶。

7.碳酸鈣(鐘乳體)

加稀鹽酸溶解,同時有氣泡發生。

8.硅質

加硫酸不溶解。

九、鑒別由粉末藥材制成的成方制劑時,散劑照上述粉末制片法制片;丸劑片劑等,可取2~3丸(片)研細后,取少量樣品,滴加規定的試液,攪拌均勻,使粘結的細胞、組織散離,再按粉末特征進行鑒別;蜜丸可直接挑取少量樣品制片,或酌用熱水脫蜜后制片觀察。

2 附:顯微試液配制法

三氯化鐵試液

取三氯化鐵1g,加水使溶解成100ml,即得。

水合氯醛試液。

甘油醋酸試液

取甘油、醋酸及水各等份,混勻,即得。

蘇丹Ⅲ試液。

釕紅試液

取10%醋酸鈉溶液1~2ml,加釕紅適量使呈酒紅色,即得。

本液應臨用新制。

間苯三酚試液

取間苯三酚1g,加90%乙醇100ml使溶解,濾過,即得。

本液應置棕色玻璃瓶內,在暗處保存

組織解離液

(1)取硝酸10ml,加入100ml水中,混勻。 (2) 取鉻酸10g,加水100ml使溶解。用時將二液等量混合,即得。

品紅甘油膠

取動物膠1g,加水6ml,浸泡溶化,再加甘油7ml,加熱并輕輕攪拌至完全混勻,用紗布濾于培養皿內,加堿性品紅溶液(堿性品紅0.1g,加無水乙醇600ml及樟油80ml,溶解)適量,混勻,凝固后即得。

α-萘酚試液

取15%的α-萘酚乙醇溶液10.5ml,緩緩加硫酸6.5ml,混勻后再加乙醇40.5ml及水4ml,混勻,即得。

銅氨試液

取碳酸銅0.5g,加水適量,置乳體中研磨,再加濃氨溶液10ml使溶解,即得。

硝酸汞試液

取汞4.5g ,加發煙硝酸3ml,俟作用完畢,加等量水稀釋,即得。

本液應置棕色玻璃塞瓶內,在暗處保存。

氯化鋅碘試液

碘化鉀8g,加水8.5ml使溶解,再加無水氯化鋅2.5g使溶解,加碘適量至飽和,即得。

本液應置棕色玻璃塞瓶內保存。

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  • 評論總管
    2020/4/4 20:01:36 | #0
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本頁最后修訂于 2009年1月13日 星期二 19:01:22 (GMT+08:00)
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