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循環免疫復合物測定

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1 拼音

xún huán miǎn yì fù hé wù cè dìng

免疫復合物(IC)又稱抗原-抗體復合物。在循環中形成的一部分IC可沉積于腎小球引起免疫復合物型腎小球腎炎(ICGN)。測定循環中的IC,有助于診斷ICGN、判斷免疫抑制藥治療的效果,以及決定腎移植的適當時間。但是IC也可存在于其它系統的IC疾病。檢測IC可用物理化學生物學二類方法,后一類方法特異性靈敏度均較高。

2 物理化學方法

根據IC的體積比抗原或抗體都大,所以可用凝膠過濾聚乙二醇沉淀法進行分離檢測,這一類方法不能區別與IC分子大小相同的各種物質,故特異性較差。

3 生物學方法

抗原抗體形成復合物后,抗體分子生物學性質會發生改變,利用這種改變設計的方法包括C1q放射分析法,Raji細胞分析法,抗一抗體分析法(凝集抑制)。常用的有以下四種,第四種比較簡便,在國內已應用。①125I-C1q結合試驗:IC通過經典途徑激活補體系統,故可用125I-C1q檢測。首先血清樣品與EDTA保溫或加熱,然后再將血清與125I-C1q及聚乙二醇保溫,以沉淀與IC結合的125I-C1q,沉淀經過洗滌后測放射活性,放射活性與血清中IC的量成正比。②Raji細胞分析法:Raji細胞是一種淋巴母細胞樣細胞,(來源于白血病病人名Raji)。這種細胞的特點是其表面具有IgG·Fc及C3b,C3d,C1q的受體,而缺乏表面Ig。在細胞生長周期中的某些時期其C3受體親和力會大大超過Fc受體,因此可用Raji細胞通過其表面的C3受體去固定已被激活了補體系統(經典或旁路)的IC。然后用熒光素同位素標記的Ig抗血清去結合IC中的抗體作指示劑。可通過熒光顯微鏡定性、半定量)或γ計數器(定量)檢測熒光或放射活性測定IC。③抗-抗體法:利用IgG與抗原起反應后,分子發生結構改變,形成一個新的抗原位置,這位置在人及兔的IgG分子的Fab部分,可與天然存在于人血清中的抗體(抗-抗體)起作用。這一方法檢測IC是利用抗-抗體與IC結合而抑制了抗-抗體與Rb致敏紅細胞的凝集作用。本法易做,對IC特異性也很高(含有抗-抗體的人血清可從人群中查到)。④聚乙二醇沉淀法:用一定濃度的聚乙二醇沉淀IC,然后取出沉淀的IC,再使之溶解并用分光光度計在280nm進行蛋白定量測定IC。方法簡便,取材容易。測定IC的方法近年來進展快,共有十余種,某中以抗-抗體法最特異,血小板合法敏感。測定時最好用幾種方法同時進行,這樣可防止非特異性陽性反應;另一方面不同方法還可區分IC的型別,如抗-抗體凝集抑制法僅可測IC中含IgG類的Ig,但它對有或無補體連結的反應物均可進行檢測;Raji細胞分析法可檢測所有激活C3的IC,而C1q結合分析法檢測激活補體系統經典途徑的IC。

循環IC大量存在于系統性紅斑狼瘡及腎小球腎炎伴有其它系統損害的免疫復合物疾病。在原發性腎小球腎炎IC較少。有些腎臟疾病IC在血中呈間歇性出現如鏈球菌感染腎炎僅出現于急性期,而IgG-IgA腎臟病在惡化時才可測到。還有一種IC形成于腎小球內的ICGN,IC并不進入循環,故血清中測不到。免疫復合物的檢測及分離可提供進一步鑒定其中抗原的性質,這有助于分析ICGN的病因和發病機理。

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  • 評論總管
    2021/2/25 22:15:53 | #0
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