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血乳酸

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1 拼音

xuè rǔ suān

2 英文參考

Blood Lactic Acid

3 概述

乳酸是體內糖代謝的中間產物,主要由紅細胞橫紋肌和腦組織產生,血液中的乳酸濃度主要取決于肝臟腎臟的合成速度和代謝率。在某些病理情況下(如呼吸衰竭循環衰竭時),可引起組織缺氧,由于缺氧可引起體內乳酸升高。另外,體內葡萄糖代謝過程中,如糖酵解速度增加,劇烈運動、脫水時,也可引起體內乳酸升高。體內乳酸升高可引起乳酸中毒檢查血乳酸水平,可提示潛在疾病的嚴重程度。

4 血乳酸的別名

血液乳酸

5 血乳酸的醫學檢查

5.1 檢查名稱

血乳酸

5.2 分類

血液生化檢查 > 氨基酸、氮化物、有機酸測定

5.3 血乳酸的測定原理

(1)全血乳酸測定(分光光度法):在NAD存在下,LDH催化乳酸脫氫,氧化成丙酮酸。加入硫酸肼使丙酮酸不斷被轉換消除,并促進反應完成。反應完成后生成的NADH與乳酸為等摩爾,在340nm波長下測定NADH的量,計算乳酸的含量。

(2)血漿乳酸測定(比色法):以氧化型輔酶Ⅰ(NAD)作氫受體,LDH催化L-乳酸脫氫,生成丙酮酸,NAD轉變成還原型輔酶Ⅰ(NADH)。酚嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)將NADH的氫傳遞氯化硝基四氮唑藍(NBT),使其還原。在530nm波長的吸光度與乳酸含量呈線性關系

5.4 試劑

(1)全血乳酸測定(分光光度法):

①50g/L偏磷酸MPA):稱取5.0g MPA,溶于蒸餾水中,并稀釋到100ml,新鮮配制。

②30g/L偏磷酸:稱取3.0g MPA,溶于蒸餾水中,并稀釋到100ml,新鮮配制。

③Tris-硫酸肼緩沖液,pH9.6(Tris 79mmol/L;硫酸肼400mmol/L);取1mol/L氫氧化鈉350ml,加入Tris 4.79g,硫酸肼26g,EDTA-Na2 0.93g,以1mol/L氫氧化鈉調至pH 9.6,用蒸餾水稀釋到500ml,4℃保存穩定8天。

④27mmol/L NAD溶液:根據需要量稱取NAD溶于蒸餾水中,4℃可穩定48h。

⑤LDH溶液:取LDH原液,用生理鹽水稀釋成1500U/ml(如用SigmaⅢ型LDH,該制品從牛心提制,每毫升含10mg蛋白,每毫克蛋白具有LDH活性400~600U,用鹽水稀釋成3mg/ml蛋白即可)。

⑥1mmol/L(9.08mg/dl)乳酸標準液:精確稱取L-乳酸鋰9.6mg(或DL-乳酸鋰19.2mg),以少量蒸餾水溶解,加入25μl濃硫酸,用蒸餾水稀釋到100ml,4℃保存可長期穩定。

(2)血漿乳酸測定(比色法):

①0.1mol/L Tris-HCl緩沖液(pH 9.0):取Tris 12.12g,溶于約800ml蒸餾水中,加入TritonX-100 40ml,混勻,以1mol/L鹽酸調節至pH9.0,蒸餾水稀釋至1L。

②無乳酸蛋白液:取Sephadex G25,用蒸餾水充分溶脹后裝柱。層析柱內徑16mm,裝柱高360mm。有蒸餾水反復流洗后,取20ml肝功能試驗正常的混合血清上柱,用蒸餾水洗脫。待洗脫物開始出現混濁時收集,共收集20ml,加入少許氯化鈉(約0.1g)及疊氮鈉20mg,置冰箱保存。按本法測定乳酸(即無乳酸蛋白液代替標本進行測定),測定管與對照管吸光度之差應小于0.015。可按100ml上述緩沖液加無乳酸蛋白液5ml,混合后置冰箱保存。

乳酸脫氫酶溶液:用全血法。

④5mmol/L乳酸標準液:溶解DL-乳酸鋰96mg或L-乳酸鋰48mg于蒸餾水中并稀釋至100ml,4℃保存。LDH只催化L(+)-乳酸。

呈色劑:溶解NBT82mg于20ml蒸餾水中,可稍加熱助溶,不溶物需離心去除。再加入NAD200mg,最后中入PMS 5mg,混合后置棕色瓶中,4℃保存,至少可用6個月。

5.5 操作方法

(1)全血乳酸測定(分光光度法):按表1進行。

(2)血漿乳酸測定(比色法):按表2進行。

混勻后,用分光光度計在530nm波長,10mm光徑比色杯,以蒸餾水調零讀取各管吸光度。

5.6 正常值

(1)全血乳酸測定(分光光度法):全血乳酸0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl)。尿液乳酸為5.5~22mmol/24h。

(2)血漿乳酸測定(比色法):小于2.4mmol/L(22.0mg/dl,呈正偏態分布,95%百分位數上限)。

5.7 化驗結果臨床意義

組織嚴重缺氧可導致三羧酸循環中丙酮酸需氧氧化的障礙,丙酮酸還原成乳酸的酵解作用增強,血中乳酸與丙酮酸比值增高及乳酸增加,甚至高達25mmol/L。這種極值的出現標志著細胞氧化過程的惡化,并與顯著的呼吸增強、虛弱、疲勞、恍惚及最后昏迷相聯系。即使酸中毒及低氧血癥已得到處理,此種高乳酸血癥常為不可逆的。見于休克的不可逆期、無酮中毒的糖尿病昏昏迷和各種疾病的終末期

在休克、心失代償、血液病和肺功能不全時,常見的低氧血癥同時有高乳酸血癥,在低氧血癥及原發條件處理后常是可逆的。在肝臟灌流量降低的病例,乳酸由肝的移除顯著降低,會出現乳酸酸中毒

5.8 附注

(1)全血乳酸測定(分光光度法):

①應在空腹及休息狀態下抽血。不用止血帶,不可用力握拳。如用止血帶,應在穿刺后除去止血帶2min后再抽血。最好用肝素化的注射器抽血,抽取后立即注入預先稱量的含冰冷蛋白沉淀劑的試管中。如用血漿測定,每毫升血用10mg氟化鈉及2mg草酸鉀抗凝,立即冷卻標本,并在15min內離心。

抽血前試管編號,稱重(Wt)并記錄。加入6ml MPA(50g/L),再稱重(Wm后放入冰浴中,每份標本最好作雙管分析。抽血后,立即注入上述試管中,每管2ml。顛倒混合3次,不可產生氣泡。待試管溫度與室溫平衡后,再稱重(Wb)。靜置至少15min后,離心沉淀(400r/min,15min)。上清液必須澄清。計算稀釋因數D:

D=Wb-Wt/Wb-Wm

②偏磷酸在水溶液易中形成多聚體(HPO3),水化成正磷酸(HPO3+H2O→H3PO4)。正磷酸不沉淀蛋白質,偏磷酸溶液沉淀蛋白的能力在4℃時僅能維持大約1周。

③本法線性范圍達5.6mmol/L(50mg/dl)。

④本法不用過氯酸作蛋白沉淀劑。

⑤一般乳酸鋰未標明L-或DL-者,均為DL-型,L-型乳酸鋰價格昂貴。

(2)血漿乳酸測定(比色法):

①本法條件下,NBT還原生成物在反應液中十分穩定,無混濁和沉淀,吸光度久置不變。

②肝素抗凝血漿、血庫ACD保養液抗凝血漿、腦脊液、尿液、胃液等均可用本法測定。

③加入蛋白質對反應及生成物溶液的穩定是必要的。同時加入蛋白質及表面活性劑,可提高靈敏度及穩定性。Brij-35和TritonX-100有同樣效果。人血清白蛋白中含乳酸濃度較高,不適用。因人血清白蛋白的顯色強度平均較牛血白蛋白高1.06倍,如用牛血清白蛋白,且僅加于標準管中時,標準管吸光度須乘此數。

④無乳酸蛋白液可與緩沖液預先混合后再加入1ml,代替表2中分別加入。

⑤本法線性范圍達8.0mmol/L(73mg/dl)。

⑥吸光度隨孵育時間延長而增加,必須準確10min。加入0.1mol/L鹽酸后吸光度不變。

抗凝劑用肝素-氟化鈉較好(1mg肝素,6mg氟化鈉可抗凝5ml血)。血液抽出后,血標本管置冰浴中送檢,盡快分離血漿,放冰室保存待測。草酸鉀對LDH有一定抑制作用,抽血較少而草酸鉀相對多時尤為明顯。

5.9 相關疾病

脫水、昏迷、糖尿病、乳酸酸中毒

相關文獻

開放分類:血液生化檢查氨基酸、氮化物、有機酸測定化驗及醫學檢查
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  • 評論總管
    2019/9/16 2:02:35 | #0
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本頁最后修訂于 2013年2月23日 星期六 11:33:21 (GMT+08:00)
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