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血漿游離皮質醇

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1 拼音

xuè jiāng yóu lí pí zhì chún

2 英文參考

Plasma free cortisol

3 概述

正常情況下,游離皮質醇含量僅占其總量的5%以下,但正是這極少部分皮質醇發揮著生作用血漿游離皮質游離皮質醇屬生物活性部分。

4 血漿游離皮質醇的醫學檢查

4.1 檢查名稱

血漿游離皮質醇

4.2 分類

激素類測定 > 腎上腺素測定

4.3 取材

血液

4.4 血漿游離皮質醇的測定原理

皮質醇為腎上腺皮質所分泌的糖皮質激素,標記抗原樣品中的抗原對特異抗體產生競爭抑制反應,當加入標記抗原和抗體的量恒定時,則帶標記的結合物形成與抗原的含量成反比,根據標準曲線求出樣品的含量。

4.5 試劑

(1)0.1mol/L pH7.0磷酸-氯化鈉緩沖液(PBS)0.2mol/L NaH2PO4·2H2O100ml,0.2mol/L Na2HPO4·12H2O 400ml,NaCl 9g,加水至1000ml。

(2)1g/L明膠-磷酸緩沖液(W/V):簡稱1g/L GPS,貯于4℃。

(3)5g/L明膠-磷酸緩沖液(W/V)  簡稱5g/L GPS,貯于4℃。

(4)2.5g/L DCC溶液葡聚糖T70 250mg,溶于PBS 100ml,加活性炭NoritA2.5g,攪拌或振搖1h,貯于4℃,使用時再用PBS10倍稀釋。

(5)閃爍液:對聯三苯(TP)4g,1.4-雙-2-(5-苯基噁唑基)苯(POPOP)125mg,醋酸乙酯250ml,二甲苯1000ml,室溫避光保存

(6)抗體:皮質醇-C21-牛血白蛋白為抗原免疫家兔,抗體的工作液濃度為1∶3800,對皮質酮17-羥孕酮的交叉分別為10%和17%。

(7)氚標皮質醇:[1,2-3H]皮質醇,比活性(SA)=148×1016Bq/mmol(40Ci/mmol),放化純度>95%,工作液用無水乙醇配成7000cpm/10μl,密封,貯存于4℃。

(8)皮質醇標準液:上海第九制藥廠層析純,工作液用無水乙醇配成2ng/100μl,密封,4℃保存。

4.6 操作方法

(1)血漿和尿樣品測定:取0.1ml血漿或萬分之一的24h混合尿,都用蒸餾水稀釋至0.5ml,于10ml抽提管中,加二氯甲烷5ml和0.1mol/L NaOH0.2ml,抽提5min,靜止片刻棄去上層液,下層二氯甲烷抽提液用水洗2次,每次1ml,搖1min,離心1500r/min 3min,棄去水層,取二氯甲烷提取液雙份各1ml(復管),45℃壓縮空氣吹干,加3H-皮質醇7000cpm/10μl,45℃吹干,各管加0.2ml抗血清應用液(1∶3800用1g/L GPS稀釋),搖勻置4℃過夜,以下步驟同標準管。

(2)標準曲線制作:0,0.1,0.3,0.6,1.0,2.0,4.0ng(各點做復管),各管加3H-皮質醇10ml,吹干,每管加抗體0.2ml,另取四管各加3H皮質醇10ml,分別加1g/L GPS 0.7和0.2ml其中二管作總脈沖測定管,另二管作非特異性測定(BN%)搖勻后,放4℃過夜。次日各管加5g/L GPS0.1ml搖勻,再加2.5g/L DCC0.5ml(總管T不加)。分離游離與結合物;搖勻4℃停放10min,3000r/min離心10min吸取上清液0.4ml,加到8ml閃爍液中,混旋1min,避光4h后,用液爍計數儀測量

4.7 正常值

放射免疫分析法RIA法):

上午(8:00):166.5~441.4nmol/L

下午(16:00):55.18~248.3nmol/L

午夜(0:00):63.4~129.6nmol/L

4.8 化驗結果臨床意義

(1)升高:庫欣綜合征(皮質醇增多增多癥)、異位產生ACTH腫瘤燕麥肺癌胰腺癌甲狀腺癌甲狀旁腺癌、卵巢癌睪丸癌、大腸癌膽囊癌乳腺癌、縱膈瘤等)、垂體前葉功能亢進癥。

(2)降低:腎上腺皮質功能低下、原發性腎上腺皮質功能減退癥(艾迪生病)、西蒙病(Sinmond病)、希恩綜合征(sheehan病)、先天性腎上腺皮質增生癥、長期應用類固醇激素。

4.9 附注

(1)各管加入3H或標準必須吹干,然后加抗體,因為3H或標準是乙醇配制,否則會損害抗體。

(2)加定量的3H須根據實驗情況而定(本文加7000cpm),在相應的范圍內3H抗原加入量越少靈敏度就越高。

4.10 相關疾病

庫欣綜合征、肺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、大腸癌、膽囊癌、乳腺癌、原發性腎上腺皮質功能減退癥、腎上腺皮質功能減退癥、希恩綜合征、先天性腎上腺皮質增生癥

相關文獻

開放分類:化驗及醫學檢查腎上腺素測定激素類測定
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參與討論
  • 評論總管
    2019/4/26 1:40:52 | #0
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