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血氨

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1 拼音

xuè ān

2 英文參考

blood ammonia

3 概述

人體內的氨是蛋白質代謝過程中通過氨基酸氨基腎臟使谷氨酰胺分解腸道細菌作用而生成。大部分氨在肝內通過鳥氨酸循環合成尿素。一部分被用于酮酸的氨基化,合成谷氨酰胺,在腎內形成銨鹽從尿中排出。血氨在診斷治療肝昏迷肝性腦病中占重要地位,尿中氨測定是估價體內酸堿平衡紊亂的指標之一,血氨的測定方法離子交換樹脂法、直接法、電極法及酶法,其中酶法以其簡單、特異性高而被廣泛應用。

4 血氨的醫學檢查

4.1 檢查名稱

血氨

4.2 分類

血液生化檢查 > 氨基酸、氮化物、有機酸測定

4.3 取材

血液

4.4 取材

血液

4.5 血氨的測定原理

血漿氨的酶法測定基于下列反應

在過量α-酮戊二酸、NAD(P)H和足量谷氨酸脫氫脫氫酶(GLDH)條件下,酶促反應的速率,即NAD(P)H轉變成NAD(P)使340nm吸光度的下降速率與反應體系中氨的濃度呈正比關系。

4.6 試劑

全部試劑必須用去氨水制備。去氨水用蒸餾水經氫型陽離子交換樹脂處理獲得。

(1)66.7mmol/L KH2PO4溶液:取9.12g KH2PO4溶入去氨水中,定溶到1L,4℃保存

(2)66.7mmol/L Na2HPO4溶液:取9.51g Na2HPO4溶解并加去氨水到1L,4℃保存。

(3)pH8.0(±0.05),66.7mmol/L磷酸緩沖液(PB):取5ml“1”液及95ml“2”液,混合,4℃保存,穩定3周。

(4)310mmol/L α-酮戊二酸:取0.45gα-酮戊二酸,溶于5ml去氨水中,用3mol/L氫氧化鈉調pH至接近5.0時,改用0.1mol/L氫氧化鈉調pH至6.8(±0.01),切勿調得過堿,因高pH可破壞α-酮戊二酸,以去氨水稀釋到10ml,4℃穩定10天;

(5)NADPH貯存液:稱約10mgN-ADPH(-20℃、干燥器保存)溶于1mlPB中取出50μl,以PB稀釋到5ml為工作液,以PB調零,1cm光徑,在340nm波長讀NADPH工作液的吸光度,計算NADPH貯存液中實際濃度:

6.22為NADPH的毫摩爾吸光系數,據上式計算結果確定制備GLDH工作液中加入NADPH貯存液的量,使達到149μmol/L。

(6)GLDH工作液:根據GLDH酶制品(-20℃干燥器中保存)的比活,稱出酶活力為992U的相應量(如比活為50U/mg蛋白,則稱20mg),如GLDH在甘油中,可按U/ml吸出992U的相應體積,置50ml量瓶中,稱入ADP(-20℃,干燥器中保存)15mg,吸入計算量的NADPH貯存液,以PB稀釋到50ml,4℃保存可穩定7天;

(7)氨標準貯存液,100mmol/L:稱取(NH42SO4 660.7mg,溶于去氨水定容到100ml,4℃保存;

(8)氨標準應用液:用去氨水分別稀釋貯存液成25、50、100、及150μmol/L。

4.7 操作方法

所用分光光度計需配有37℃恒溫比色系統及340nm波長。如用自動分析儀,可根據本法反應條件自行設計,樣品及試劑用量按比例減少。

操作見表1,按B、S、U管先后順序進行。

混勻,于10s時讀A10s于70s時讀A70s,求各管的△A,即△A=A10s-A70s

4.8 正常值

18~72μmol/L。

4.9 化驗結果臨床意義

正常情況下,氨在肝臟中轉變為尿素。嚴重肝臟疾病時,氨不能從循環中清除,引起血氨增高。高血氨有神經毒,引起肝性腦病(肝昏迷)。故成人血氨測定主要用于肝昏迷的監測和處理。

此外,血氨測定對兒科診斷Reye綜合征非常有用。該征有嚴重低血糖、大塊肝壞死、急性肝衰,并伴有肝脂肪變性,在肝酶譜增高前,即見血氨增高。對診斷某些先天代謝紊亂,如鳥氨酸循環的氨基酸代謝缺陷(高血氨)也很重要。

4.10 附注

(1)各試劑成分的終濃度:磷酸鹽540mmol/L,α-酮戊二酸10mmol/L,NAD-

PH 120μmol/L,ADP0.5mmol/L,GLDH16U/ml。

(2)酶法測定血漿氨具有特異、簡便、快速等優點,且可上自動分析儀。腺苷二磷酸(ADP)可穩定GLDH,增強反應速率。NADPH作輔酶較NADH可縮短反應時間,但前者價格更貴。

(3)血漿中LDH、AST等也可利用NAD(P)H而產生內源性的消耗,直接影響血漿氨測定結果,起動劑α-酮戊二酸加入前37℃加溫10min為NAD(P)H內源性消

耗反應時間。

(4)血漿氨測定的準確性在很大程度上取決于標本收集是否符合要求。用EDTA·Na2抗凝,靜脈采血抗凝劑充分混勻后立即置冰水中,盡快分離血漿,加塞置2~4℃保存,在2~3h內分析;-20℃可穩定24h,顯著溶血者不能用,因紅細胞中氨濃度為血漿的2.8倍。

(5)線性范圍0~150μmol/L,日常工作中可僅用100μmol/L標準應用液。

(6)如測定值超出線性范圍,可用去氨水稀釋血漿后重作。

(7)血氨含量甚微,要防止環境及所用各種器皿中氨的影響。

(8)國內已有血漿氨酶法測定試劑盒,請按說明書操作。如中生公司的試劑盒,用三乙醇胺緩沖液,NADPH作輔酶,NADPH內源性消耗反應在室溫中需反應20min。

4.11 相關疾病

昏迷、肝性腦病、低血糖

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開放分類:血液生化檢查氨基酸、氮化物、有機酸測定化驗及醫學檢查
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參與討論
  • 評論總管
    2019/8/18 7:08:33 | #0
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本頁最后修訂于 2013年2月24日 星期日 16:03:07 (GMT+08:00)
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