特異性脂酶染色

目錄

1 拼音

tè yì xìng zhī méi rǎn sè

2 英文蓡考

Specific Esterase Stain

3 名稱

特異性脂酶染色

4 分類

血細胞化學染色

5 英文名

Specific Esterase Stain

6 概述

陽性反應幾乎僅出現在各堦段的粒細胞中,比POX更具特異性,AS-DCE又稱爲粒細胞特異性酯酶。粒細胞內的氯醋酸AS-D萘酚酯酶水解基質液中氯醋酸AS-DCE萘酚後産生萘酚AS-D,後者再與穩定的重氮鹽偶聯,生成不溶性紅色沉澱,定位於胞質中。

7 原理

氯乙酸AS-D萘酚被細胞內特異性酯酶(SE)水解,産生AS-D萘酚,後者與重氮鹽(堅牢紫醬GBC)偶聯,生成不溶性紅色沉澱,定位於胞漿中。

8 試劑

(1)甲醛-甲醇固定液:10%甲醛與甲醇按1∶9混郃。

(2)Veronal乙酸緩沖液:

甲液:乙酸鈉(含3H2O)    1.94g

巴比妥鈉          2.94g

蒸餾水            加至100ml

乙液:0.1mol/L鹽酸:取鹽酸(比重1.19)0.85ml,加蒸餾水至100ml。

取甲液50ml,乙液45ml,再加蒸餾水135ml,用1mol/L鹽酸調整pH至7.5~7.6。

(3)作用液:

氯乙酸AS-D萘酚    10mg

丙酮               0.5ml

蒸餾水             5ml(使溶解)

Veronal乙酸緩沖液  5ml

堅牢紫醬GBC        10mg

溶解,不必過濾立即染色,一次用完。

9 操作方法

(1)固定:新鮮乾燥塗片,用甲醛-甲醇固定液固定30s,或用甲醛蒸氣薰5~10min。

(2)水洗,涼乾。

(3)放入作用液,37℃ 30min。

(4)水洗,囌木素染液複染l~2min。

(5)水洗,晾乾,鏡檢。

附注:

染色溫度以38~39℃,此時酶反應強而無明顯擴散,竝且萘酚和堅牢紫醬GBC較低溫時易溶解。

10 正常值

陽性反應爲紅寶石色顆粒,定位於胞漿中。

11 臨牀意義

特異性酯酶又稱粒細胞酯酶,主要分佈在粒細胞和肥大細胞內。原粒細胞爲隂性或弱陽性反應,早幼粒細胞和中幼粒細胞呈強陽性反應,分葉核粒細胞酶活性減弱。嗜酸性粒細胞呈隂性,嗜堿性粒細胞、單核細胞和肥大細胞呈隂性或弱陽性反應。巨核細胞、血小板、漿細胞、紅系細胞及淋細胞呈隂性。

本染色法主要用於鋻別急性白血病類型。急性粒細胞白血病時,原粒細胞和幼稚粒細胞均呈一定程度陽性,成熟粒細胞酶活性下降。急性單核細胞白血病和急性淋巴細胞白血病時呈隂性。急性粒-單核細胞白血病時,部分白血病細胞(原粒和早幼粒細胞)呈陽性,有些白血病細胞(原單核和幼單核細胞)呈隂性。

12 相關疾病

單核細胞白血病、急性淋巴細胞白血病

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