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抗-HAV

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1 概述

甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)為一直徑為27~32nm的二十面體立體對稱圓球形顆粒,無包膜,核心為單鏈正股RNA。HAV屬小RNA病毒科肝病毒屬(hepatovirus)或嗜肝RNA病毒屬(heparnavirus)。HAV主要通過手-口途徑傳播潛伏期15~50天,平均28天。病毒常在患者血清ALT升高前的5~6天就存在于患者的血液和糞便中。發病2~3周后,隨血清中特異抗體的產生,血清和糞便的傳染性就逐漸消失。HAV的實驗室診斷可進行抗體檢測。臨床上用的最多的是用ELISA方法查甲型肝炎抗體抗體。

2 抗-HAV的別名

甲型肝炎抗體;HAV-Ab

3 抗-HAV醫學檢查

3.1 檢查名稱

抗-HAV

3.2 分類

血清學檢查 > 病毒的血清學檢查

3.3 化驗取材

血液

3.4 抗-HAV的測定原理

采用競爭ELISA法,即在板上包被HAVAg,然后同時加入待測血清和酶標甲型肝炎抗體,這樣,待測血清中如有甲型肝炎抗體抗體,則與加入的酶標甲型肝炎抗體競爭與包被的HAVAg結合,加底物后作用后顯色就淺或無色,為陽性。如待測血清中無甲型肝炎抗體抗體,則酶標甲型肝炎抗體就與包被的HAVAg結合,加底物作用后則顯深色,為陰性。測得的光密度值與抗-AHV含量成反比。

RIA方法原理基本同上,亦用競爭法。

3.5 試劑

國內有商品化試劑盒供應,內含抗μ鏈包被的反應板(條),HAV應用液,抗HAV-HRP標記物,以及抗HAV IgM陰、陽性對照血清,樣品稀釋液,洗滌液,底物液及終止液等試劑。

3.6 操作方法

應按試劑盒說明書進行檢測。一般試劑盒分兩類。

(1)三步法:本法操作步驟較多,檢測費時,有逐漸被二步法取代的趨勢。

①加稀釋樣品:在包被反應板(條)孔內加入1∶1000倍稀釋樣品100μl,每次實驗有陰、陽性對照,37℃保溫2h,洗板3次。

②加HAV:各孔加HAV 100μl,37℃ 1h后移至4℃過夜,洗板3次。

③加抗HAV-HRP:各孔加抗HAV-HRP 100μl,37℃保溫3h,洗板4次。

④顯色:各孔加入底物液100μl,37℃保溫15min。

⑤終止反應:各孔加入終止液50μl。

⑥結果判讀。

目測法:無色或略帶淡黃色為陰性,橘黃色為陽性。

比色法:在酶標儀上以試劑空白校零點,測各孔在492nm光密度值,當大于或等于4為陽性,低于4為陰性。

(2)二步法操作:按上法加稀釋樣品保溫、洗滌后,同時各孔加HAV 50μl及抗HAV-HRP 50μl,混勻后37℃保溫1h,洗板4次,以后同上法顯色和判讀結果。

3.7 正常值

陰性。

3.8 化驗結果臨床意義

甲型肝炎抗體總抗體,主要是IgG抗體。它產生于初期感染的早期,在發病時,血清中的滴度已相當高,2~3個月達高峰。甲型肝炎抗體 IgG可維持很長時間,終生可檢測到。甲型肝炎抗體 IgG是保護性抗體,獲得后一般不會再感染。出現甲型肝炎抗體 IgG本身并不能診斷為甲肝,同時存在IgM類抗體才能做出診斷。出現甲型肝炎抗體 IgG而無甲型肝炎抗體 IgM是既往感染HAV并獲得免疫力的一個標志。甲型肝炎抗體 IgG檢測可用于對甲肝的流行病調查和接種疫苗效果的觀察。母親感染過HAV的新生兒亦可檢測到甲型肝炎抗體 IgG達8個月。

3.9 附注

抗HAV-IgG出現較晚,而持續時間較長,在感染初期常為陰性。常用以流行病學調查。

相關文獻

開放分類:化驗及醫學檢查血清學檢查病毒的血清學檢查
詞條抗-HAV
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參與討論
  • 評論總管
    2019/9/19 8:37:18 | #0
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