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高鐵血紅蛋白還原試驗

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1 拼音

gāo tiě xuè hóng dàn bái hái yuán shì yàn

2 英文參考

Methemoglobin reduction test

3 概述

正常人血清中無高鐵血紅蛋白,血清中出現高鐵血紅蛋白,提示血管內溶血

4 檢查名稱

高鐵血紅蛋白還原試驗

5 分類

臨床血液檢查 > 紅細胞

6 化驗取材

血液

7 高鐵血紅蛋白還原試驗的原理

正常血紅蛋白是亞鐵血紅蛋白,可被亞硝酸氧化為高鐵血紅蛋白。當紅細胞內葡萄糖-6-磷酸脫氫-6-磷酸脫氫酶含量正常時,通過戊糖循環形成的還原型輔酶Ⅱ可作為血液中高鐵血紅蛋白還原酶的輔酶,并在遞氫體美藍的參與下,使形成的高鐵血紅蛋白還原為亞鐵血紅蛋白。當紅細胞內缺少葡萄糖-6-磷酸脫氫-6-磷酸脫氫酶時,則高鐵血紅蛋白不能被還原。高鐵血紅蛋白為暗灰色,在630~650nm波長處吸光度最高,故可加以測定。

8 試劑

(1)12.5g/L亞硝酸鈉-葡萄糖溶液:取亞硝酸鈉1.25g,葡萄糖5g,蒸餾水加至100ml。

(2)0.0001mol/L美藍溶液:取美藍0.15g,蒸鎦水加至100ml。

(3)0.02mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4):稱取磷酸氫二鈉Na2HPO4·12H2O)51mg。磷酸二氫鉀52.2mg,加蒸餾水至100ml。

9 操作方法

(1)靜脈取血1.5~2.0ml,加于含有3.8%檸檬酸鈉抗凝劑的小試管內,血液和抗凝劑接9∶1混合,加葡萄糖20mg。

(2)將此標本離心沉淀5min(1000r/min)或放置4℃冰箱過夜,待紅細胞下沉后吸去部分血漿,使紅細胞與血漿比例約為1∶1(相當紅細胞比容35%~40%)。

(3)搖勻后取此血液1ml,加12.5g/L,亞硝酸鈉-葡萄糖溶液和0.0001mol/L美藍溶液各0.05ml,顛倒混合15次,使與空氣中氧氣充分接觸,加塞,置于37℃水浴(或保溫箱)3h。

(4)取出后搖勻,吸取此液0.1ml,加于0.02mol/L磷酸鹽緩沖液10ml中,2min后于波長634nm處比色,測其吸光度為S

(5)吸取未加上述試劑但同樣保溫的血液0.1ml,加于0.02mol/L磷酸鹽緩沖液10ml中,2min后按上法進行比色,測其吸光度為B,再于此液內加12.5g/L亞硝酸鈉-葡萄糖溶液1滴,搖勻,5min后用同樣方法測其吸光度為St。

10 正常值

定性陰性

定量:還原率>75%。

11 化驗結果臨床意義

(1)陽性:葡萄糖-6-磷酸脫氫-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)缺乏癥、純合子型、中間反應為雜合子型。

(2)定量<30%:G-6-PD缺乏癥純合子型。

(3)定量74%~31%:G-6-PD缺乏癥雜合子型

12 附注

(1)受檢者紅細胞比容對結果有一定影響,比容低于30%時,高鐵血紅蛋白還原率可明顯降低故貧血患者應先調整紅細胞比容后再測定。

(2)抗凝劑以38g/L檸檬酸鈉或輸血時用的抗凝劑ACD為好,血液標本可保存1周左右。肝素抗凝也可用(每毫升血液用肝素0.5mg),但標本只能保存3天。草酸鹽抗凝不適于本法。

(3)ACD抗凝劑量不宜太多,血液與ACD抗凝劑按1∶0.15混合即可,否則可因pH降低,而使高鐵血紅蛋白還原速度減慢,以致出現假陽性

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開放分類:化驗及醫學檢查臨床血液檢查紅細胞
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  • 評論總管
    2019/10/14 6:32:21 | #0
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本頁最后修訂于 2013年2月27日 星期三 23:55:23 (GMT+08:00)
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