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cDNA

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1 英文參考

complementary DNA

cDNA為具有與某RNA鏈呈互補的堿基序列的單鏈DNA即complementary DNA之縮寫,或此DNA鏈與具有與之互補的堿基序列的DNA鏈所形成的DNA雙鏈。與RNA鏈互補的單鏈DNA,以其RNA為模板,在適當引物的存在下,由依賴RNA的DNA聚合酶(反轉錄酶)的作用而合成,并且在合成單鏈cDNA后,在用堿處理除去與其對應的RNA以后,以單鏈cDNA為模板,由依賴DNA的DNA聚合酶或依賴RNA的DNA聚合酶的作用合成雙鏈cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遺傳工程方面廣為應用。在這種情況下,mRNA的cDNA,與原來基因的DNA(基因組DNA,genomic DNA)不同而無內含子相反地對應于在原來基因中沒有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,與exon序列、先導序列以及后續序列等一起反映出mRNA結構。cDNA同樣可以被克隆

cDNA文庫的構建

分為六個階段:

階段1:反轉錄酶催化合成cDNA第一鏈

階段2:cDNA第二鏈的合成

階段3:cDNA的甲基化

階段4:接頭或銜接子的連接

階段5:Sepharose CL-4B凝膠過濾分離cDNA

階段6:cDNA與λ噬菌體臂的連接

2 mRNA反轉錄成cDNA

與RNA鏈互補的單鏈DNA,以其RNA為模板,在適當引物的存在下,由依賴RNA的DNA聚合酶(反轉錄酶)的作用而合成(即反轉錄過程中的產物),并且在合成單鏈cDNA后,在用堿處理除去與其對應的RNA以后,以單鏈cDNA為模板,由依賴DNA的DNA聚合酶或依賴RNA的DNA聚合酶的作用合成雙鏈cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遺傳工程方面廣為應用。在這種情況下,mRNA的cDNA,與原來基因的DNA(基因組DNA,genomic DNA)不同而無內含子;相反地對應于在原來基因中沒有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,與exon序列、先導序列以及后續序列等一起反映出mRNA結構。

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  • 評論總管
    2018/10/16 10:25:06 | #0
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本頁最后修訂于 2010年1月29日 星期五 1:22:11 (GMT+08:00)
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