熱詞榜

Taq DNA聚合酶

廣告
廣告
醫學百科提醒您不要相信網上藥品郵購信息!

1 拼音

Taq DNA jù hé méi

2 注解

Taq DNA聚合酶是從一種水生棲熱菌(Thermusaquaticus)yT1株分離提取的.yT是 一種嗜熱真菌,能在70~75℃生長.該菌是1969年從美國黃石國家森林公園火山溫泉中分離的。該酶基因全長2496個堿基編碼832個氨基酸,酶蛋白分子為 94KDa.其比活性為200000單位/mg.75~80℃時每個酶分子每秒鐘可延伸約150個核苷 酸,70℃延伸率大于60個核苷酸/秒,55℃時為24個核苷酸/秒.溫度過高(90℃以上) 或過低(22℃)都可影響Taq DNA聚合酶的活性,該酶雖然在90℃以上幾乎無DNA合成, 但確有良好的熱穩定性,在PCR循環的高溫條件下仍能保持較高的活性.在92.5℃、95℃ 、97.5℃時,PCR混合物中的Taq DNA聚合酶分別經130min,40min和5~6min后,仍可 保持50%的活性,實驗表明.PCR反應時變性溫度為95℃~20sec,50個循環后,Taq DNA聚合酶仍有65%的活性.Taq DNA聚合酶的熱穩定性是該酶用于PCR反應的前提條 件,也是PCR反應能迅速發展和廣泛應用的原因.Taq DNA聚合酶還具有逆轉錄活性, 其作用于類似逆轉錄酶.此活性溫度一般為65~68℃,有Mn2 存在時,其逆轉錄活性 更高.

TaqDNA聚合酶是Mg2 依賴性酶,該酶的催化活性對Mg2 濃度非常敏感.以活性程度 很低的鮭魚精子DNA為模板,dNTP的濃度為0.7~0.8mmol/L時,用不同濃度Mg2 進行 PCR反應10min,測定結果為Mgcl2濃度在2.0mmol/L時該酶催化活性最高,此濃度能最 大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性,Mg2 過高就抑制酶活性,當Mgcl2濃度在 10mmol/L時可抑制40~50%的酶活性.由于Mg2 能與dNTP結合而影響PCR反應液中游離 的Mg2 濃度,因而Mgcl2的濃度在不同的反應體系中應適當調整,優化濃度.一般反應 中Mg2 濃度至少應比dNTP總濃度高0.5~1.0mmol/L.適當濃度的KCL能使Taq DNA聚合 酶的催化活性提高50~60%,其最適濃度為50mmol/L,高于75mmol/L時明顯抑制該酶 的活性.

相關文獻

詞條Taq DNA聚合酶banlang创建
參與評價: ()

相關條目:

參與討論
  • 評論總管
    2018/12/14 22:36:12 | #0
    歡迎您對Taq DNA聚合酶進行討論。您發表的觀點可以包括咨詢、探討、質疑、材料補充等學術性的內容。
    我們不歡迎的內容包括政治話題、廣告、垃圾鏈接等。請您參與討論時遵守中國相關法律法規。
抱歉,功能升級中,暫停討論
特別提示:本文內容為開放式編輯模式,僅供初步參考,難免存在疏漏、錯誤等情況,請您核實后再引用。對于用藥、診療等醫學專業內容,建議您直接咨詢醫生,以免錯誤用藥或延誤病情,本站內容不構成對您的任何建議、指導。

本頁最后修訂于 2010年3月17日 星期三 22:11:40 (GMT+08:00)
關于醫學百科 | 隱私政策 | 免責聲明
京ICP備13001845號

京公網安備 11011302001366號


鏈接及網站事務請與Email:聯系 編輯QQ群:8511895 (不接受疾病咨詢)