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GBZ/T 295—2017 職業人群生物監測方法 總則

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目錄

1 拼音

GBZ/T 295—2017 zhí yè rén qún shēng wù jiān cè fāng fǎ zǒng zé

2 英文參考

General principles of biological monitoring method in occupational population

3 基本信息

ICS 13.100

C 52

中華人民共和國國家職業衛生標準 GBZ/T 295—2017《職業人群生物監測方法 總則》(General principles of biological monitoring method in occupational population)由中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會于2017年09月30日發布,自2018年04月15日起實施。

4 發布通知

關于發布《職業人群生物監測方法總則》等4項推薦性國家職業衛生行業標準的通告

國衛通〔2017〕18號

現發布《職業人群生物監測方法 總則》等4項推薦性國家職業衛生行業標準,編號和名稱如下:

GBZ/T 295—2017 職業人群生物監測方法 總則;

GBZ/T 296—2017 職業健康促進名詞術語

GBZ/T 297—2017 職業健康促進技術導則;

GBZ/T 298—2017 工作場所化學有害因素職業健康風險評估技術導則。

上述標準自2018年4月15日起施行。

特此通告。

國家衛生計生委

2017年9月30日

5 前言

根據《中華人民共和國職業病防治法》制定本標準。

本標準按照GB/T 1.1—2009給出的規則起草。

本標準主要起草單位:中國疾病預防控制中心職業衛生與中毒控制所、浙江醫學科學院、深圳市寶安區疾病預防控制中心、廣東省職業病防治院、浙江省疾病預防控制中心、武漢市職業病防治院、江蘇省疾病預防控制中心、重慶市職業病防治院、四川省疾病預防控制中心、深圳市職業病防治院。

本標準主要起草人:閆慧芳、趙瑋、陶雪、錢亞玲、尹江偉、吳邦華、沈向紅、宋為麗、李曉娟、龔進、崔師偉、李海斌、雍莉、劉奮、李添娣。

6 標準正文

職業人群生物監測方法 總則

6.1 1 范圍

本標準規定職業病危害因素接觸者生物樣品生物監測指標檢測的實驗室基本要求、方法的選擇與證實、實驗用品、溯源標準和標準物質的選擇及應用、生物樣品的采集、運輸和儲存、檢測過程質量控制、數據處理與結果表述等。

本標準適用于工作場所有害因素職業接觸者生物樣品中生物監測指標的檢測。

6.2 2 規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 8170 數值修約規則與極限數值的表示和判定

GB 19489 實驗室生物安全通用要求

GB/T 27476.1 檢測實驗室安全 第1部分:總則

GB/T 27476.5 檢測實驗室安全 第5部分:化學因素

GBZ/T 224—2010 職業衛生名詞術語

檢驗檢測機構資質認定評審準則  國家認證認可監督管理委員會

6.3 3 術語和定義

下列術語和定義適用于本文本。

3.1

生物接觸限值 biological exposure limit;  BEL

針對勞動者生物材料中的化學物質或其代謝產物、或引起的生物效應等推薦的最高容許量值,也是評估生物監測結果的指導值。每周5天工作、每天8小時接觸,當生物監測值在其推薦值范圍以內時,絕大多數的勞動者將不會受到不良的健康影響。又稱生物接觸指數(biological exposure indices, BEIs)或生物限值(biological limit values,BLVs)。

注:改寫GBZ/T 224—2010,定義5.9。

3.2

生物監測 biological monitoring

系統地對勞動者的血液、尿等生物材料中的化學物質或其代謝產物的含量(濃度)、或由其所致的無害生物效應水平進行的系統監,目的是評價勞動者接觸職業性有害因素的程度及可能的健康影響。

注:改寫GBZ/T 224—2010,定義6.1.2。

3.3

生物監測對象 biological monitoring object

根據生物監測的需要,選定具有代表性的、進行生物材料采樣和檢測的勞動者。

3.4

生物樣品 biological sample

根據生物監測需要采集的、具有代表性的、作為監測樣品人體生物材料。

[GBZ/T224-2010,定義6.5.1]

3.5

生物監測指標 indicator(s) of biological monitoring

職業接觸有害物質后,機體內存在的并可用于生物監測的有害物質及其代謝物,或由它們所致的效應指標。

[GBZ/T224-2010,定義6.5.3]

3.6

班前 prior to shift

職業接觸以后16h(下一班開始前30min以內)。

注:改寫GBZ/T224-2010,定義6.5.7。

3.7

班中 during shift

職業接觸2h以后至下班前之間。

注:改寫GBZ/T224-2010,定義6.5.8。

3.8

班末 end of shift

停止職業接觸之后盡可能短的時間(30 min)內。

注:改寫GBZ/T224—2010,定義6.5.9。

3.9

工作周末 end of the work week

在連續職業接觸4d或5d后盡可能短的時間(30 min)內。

3.10

全日尿(24 h尿液) diurnal urine

停止職業接觸以后24 h以內的所有尿液

3.11

校準曲線法 calibration curve method

在規定條件下,被測量值與儀器儀表實測得值之間關系繪制曲線,并采用該曲線對樣品的實際測量值進行定量的方法。校準曲線法分為工作曲線法(標準系列溶液和樣品均需要按照同一方法進行預處理的方法)和標準曲線法(標準系列溶液不需要進行預處理的方法)。

3.12

內標校準曲線法 intemal standard calibration curve method

選擇樣品中不含有的物質作為內標物加入標準系列溶液中,以標準系列溶液中待測物和內標物的響應信號比值與待測組分的量繪制校準曲線的方法。

3.13

方法檢出限 method detection limit;MDL

樣品經過方法分析,當檢測結果準確度為75 %~125%,置信水平在95%,方法能夠定性檢出待測物的最小量。

3.14

方法定量下限  method quantitative limit;  MQL

樣品經過方法分析,當檢測結果準確度為75%~125%,置信水平在95%,方法能夠準確定量檢測待測物的最小量。

3.15

儀器檢出限 instrument detection limit;IDL

分析儀器能定性檢出與背景信號相區別的最小量。

3.16

方法空白  method blank

在實驗室內按照方法要求檢測所產生的信號或量值,包括方法所涉及到的容器、試劑、儀器和環境等。

3.17  容器空白 container blank

檢測所使用的器皿按照方法要求檢測所產生的信號或量值。

3.18

采樣容器空白  sampling container blank

實驗室留存的容器(未帶入現場且未進行樣品收集的容器),按照方法要求檢測所產生的信號或量值。

3.19

樣品空白  sample blank

在樣品采集現場,以相應介質(如純水)代替生物樣品采集到樣品容器中。

3.20

試劑空白 reagent blank

檢測所使用的試劑溶液按照方法要求檢測所產生的信號或量值。

3.21

儀器空白 instrument blank

分析儀器本身按照方法要求檢測所產生的信號或量值。

3.22

樣品保存期 sample holding time

在指定的運輸和儲存條件下,樣品中待測物的劑量能夠保持穩定的期限。

6.4 4 實驗室基本要求

4.1 實驗室管理要求

實驗室管理應符合GB 19489、GB/T 27476.1、GB/T 27476.5和《檢驗檢測機構資質認定評審準則》的相關管理要求。

4.2 實驗室防護

接觸生物樣品人員的手部不應有皮膚破損或外傷,實驗過程中應配戴符合要求的防護手套、口罩和防護眼鏡。

4.3 廢物處理

廢棄生物樣品及實驗過程產生的廢棄物應按照無害化的要求進行處置。

6.5 5 方法的選擇與證實

6.5.1 5.1 基本原則

5.1.1 同一個生物監測指標如果有兩個及以上的標準檢測方法時,可根據設備及技術條件選擇方法使用,但以第一法為仲裁法。

5.1.2 標準方法中的儀器設備條件為參考條件,實驗室可根據所采用的儀器設備情況進行適當的調整,以滿足方法技術指標的要求。

5.1.3 當檢測少量樣品(一般少于5個)時,可依據標準方法采用標準加入法進行定量檢測。

5.1.4 實驗室應對方法的主要技術指標(包括:方法測定范圍、方法準確度、方法精密度、方法檢出限、方法定量下限)進行確認,并滿足標準方法的技術要求。

6.5.2 5.2 方法測定范圍

參照標準方法推薦的測定范圍,按照標準要求配制校準曲線并檢測,用待測物濃度(或含量)與儀器響應值計算線性回歸方程,相關系數達到0.9950~0.9999,以確定實驗室的儀器滿足方法測定范圍要求。

6.5.3 5.3 方法準確度

采用但不限于下列方法進行準確度確認:

a)選用基質相同或相近,含有高、低兩個劑量水平待測物的標準物質,按照標準方法進行檢測,檢測結果在標準物質的參考值范圍內。

b)選用基質相同或相近,含有高、低兩個劑量水平待測物的質量控制樣品按照標準方法進行檢測,檢測結果在質量控制樣品的參考值范圍內。

c)采用樣品加標回收的方式,即選用基質相同或相近的樣品加入高、低兩個劑量水平的待測物,按照標準方法進行檢測,樣品的加標回收率滿足標準方法的要求。

6.5.4 5.4 方法精密度

5.4.1 方法批內精密度

分別取高、低兩個劑量水平待測物的樣品或模擬樣品(n≥7),分別按照標準方法進行平行預處理和檢測,樣品檢測結果的相對標準偏差滿足標準方法的要求。

5.4.2 方法批間精密度

分別取高、低兩個劑量水平待測物的樣品或模擬樣品,按照標準方法進行預處理和檢測,并在實驗室重復六次預處理和檢測,六次重復樣品檢測結果的相對標準偏差滿足標準方法的要求。

6.5.5 5.5 方法檢出限

以預估方法定量下限(參照標準方法定量下限)的樣品,按照標準方法進行分析(樣品檢測結果準確度在75%~125%范圍內),以樣品響應信號的3倍標準差(n≥7),與低劑量的待測物濃度及其響應值計算所得的待測物濃度,所得濃度即為方法檢出限(MDL),按式(1)計算:

捕獲.PNG

式中:

K——樣品預處理體積轉換倍數;

S——預估定量下限的濃度響應信號的標準差;

c——己知低劑量待測物的濃度;

b——c對應的響應信號。

6.5.6 5.6 方法定量下限

以預估方法定量下限(參照標準方法定量下限)的樣品,按照標準方法進行分析(樣品檢測結果準確度在75 %~125%范圍內),以樣品響應信號的10倍標準差(n≥7),與低劑量的待測物濃度及其響應值計算所得的待測物濃度,即為方法定量下限(MQL),按式(2)計算:

捕獲.PNG

式中:

K——樣品預處理體積轉換倍數;

S——預估定量下限的濃度響應信號的標準差;

c——預估定量下限的濃度;

b——c對應的響應信號。

6.6 6 實驗用品

6.6.1 6.1 實驗用水要求

應為純水,可采用蒸餾和離子交換方法制備,并按照檢測方法要求對待測物濃度(或含量)進行檢測,檢測結果應低于方法檢出限。

6.6.2 6.2 采樣容器和檢測器皿要求

6.2.1 必要時采樣容器和檢測器皿,在使用前按照要求進行預處理。檢測金屬、類金屬的應在使用前用50%(V/V)硝酸溶液浸泡不少于12 h,再用純水沖洗干凈;檢測有機類指標的應在重鉻酸鉀硫酸洗液中浸泡不少于12 h,再用純水沖洗干凈。

6.2.2 同批次采樣容器、采樣用品和檢測器皿均應按照5%~10%的比例進行抽檢,待測物濃度(或含量)檢測結果應低于方法檢出限。

6.6.3 6.3 實驗試劑要求

實驗用試劑應進行本底檢測,檢測結果應低于方法檢出限。

6.7 7 溯源標準和標準物質的選擇及應用

6.7.1 7.1 溯源

測量應溯源至有證標準物質基準物質,對于暫時不具備條件的應溯源至色譜純、光譜純或優級純試劑。

6.7.2 7.2 標準物質的選擇

應選擇基質相同、檢測指標劑量相當的標準物質。

6.8 8 生物樣品的采集、運輸和儲存

6.8.1 8.1 樣品采集時間段

樣品采集應嚴格按照生物接觸限值規定的時間段(班前、班中、班末、工作周末)進行。

6.8.2 8.2 樣品采集方法及注意事項

樣品采集方法及注意事項符合附錄A。

6.8.3 8.3 樣品運輸和儲存

采集的樣品按照標準方法要求進行儲存,采集后的樣品一般應在低于8℃條件下冷藏運輸。在樣品保存期內進行檢測。

6.9 9 檢測過程質量控制

6.9.1 9.1 校準曲線要求

應依據標準方法要求,檢測當天繪制校準曲線,校準曲線的相關性應≥0.995。

6.9.2 9.2 空白要求

每批樣品檢測的同時應檢測樣品空白(檢測結果提供了樣品采集過程可能引入的污染),當樣品空白檢驗結果大于方法定量下限時,應對方法空白(檢測結果提供了實驗室檢測過程可能引入的實驗室的本底值或污染)、采樣容器空白(檢測結果提供采樣容器可能引入的本底值或污染)、容器空白(檢測結果提供了器皿本身可能引入的本底值或污染)、試劑空白(檢測結果提供了試劑本身可能引入的本底值或污染)和儀器空白(檢測結果提供了儀器本身可能引入的本底值或污染)等進行檢驗,以確定樣品空白結果的來源。

6.9.3 9.3 檢測過程的質量控制

9.3.1 應采用但不限于下列方法之一進行質量控制:

a)  采用兩個劑量水平、基質相同的標準物質進行質量控制,標準物質檢測結果應在給定的參考值或允許的不確定度范圍內。

b)  采用兩個劑量水平、基質相同的質量控制樣品對檢測過程進行質量控制,質量控制樣品的檢測結果應在參考值的范圍內。

c)  采用樣品加標回收的方法進行質量控制,將兩個劑量水平(樣品水平的0.5倍~2倍)的待測物的量加至樣品中,加標回收率應符合檢測標準方法的要求,按式(3)計算:

捕獲.PNG

式中:

R——加標回收率;

m1——加標樣品的檢測結果;

m0——樣品的檢測結果;

m——標準加入的量。

9.3.2 在進行樣品檢測時,應按照樣品數目大于等于10%的比例進行平行檢測,樣品平行檢測結果的相對偏差不得大于表1的要求,按式(4)計算:

捕獲.PNG

式中:

RPD——樣品平行檢測結果相對偏差;

c1——樣品第一次檢測結果;

c2——樣品重復檢測結果。

表1樣品平行檢測結果的最大允許相對偏差

樣品濃度水平/

(μg/L或μg/kg)

1000

100

10

5

1

0.5

0.1

0.01

最大允許相對偏差/

%

10

15

20

25

30

35

40

50

9.3.2.1 采用石墨爐原子吸收分光光度計進行樣品檢測時,每進行10個樣品的檢測后,應進行標準物質或質量控制樣品檢測;采用其他儀器檢測方法時,每進行20個樣品的檢測后,應進行標準物質或質量控制樣品檢測;當標準物質或質量控制樣品檢測結果在允許的范圍內,繼續進行樣品的檢測;否則,應對上次標準物質或質量控制樣品檢測后的批次樣品重新進行檢測。

9.3.2.2 可用劑量水平相當和基質相同的一級標準物質進行檢測結果質量控制和結果修正;當一級標準物質的檢測結果未落在參考值范圍內時,可采用修正的方法對樣品檢測的結果進行修正,按式(5)計算:

捕獲.PNG

式中:

c’——樣品結果的修正值;

c——樣品的檢測結果;

c0'——級標準物質的參考值;

c0——級標準物質實驗室檢測的結果。

9.3.3 樣品檢測結果低于方法定量下限時,應使用與定量下限相當濃度(或含量)的樣品進行檢測方法核查。

9.3.4 對于接近或超出職業接觸生物限值的樣品,應對樣品進行復測;兩次樣品檢測結果的相對偏差應符合表1的要求。

6.10 10 數據處理與結果表述

6.10.1 10.1 樣品檢測結果的處理

GBZ/T 295-2017

樣品檢測結果的計算和修約依據GB/T 8170進行;樣品檢測結果原則上應比職業接觸生物限值多保留一位小數。

6.10.2 10.2 樣品和樣品空白結果的處理

樣品和樣品空白應先分別進行檢測結果計算后,再根據下列方法進行判斷處理,得到樣品最終檢測結果。

10.2.1 當樣品空白的檢測結果小于方法定量下限,樣品的檢測結果即為最終檢測結果。

10.2.2 當樣品空白的檢測結果大于等于方法定量下限,應按以下方法評估樣品空白對樣品檢測結果的相對影響率RER(按照表2進行),按式(6)計算:

捕獲.PNG

式中:

RER——樣品空白對樣品檢測結果的相對影響率;

c0——樣品空白檢測結果;

c——樣品檢測結果。

表2 樣品空白對樣品檢測結果的最大允許相對影響率

樣品空白濃度水平/

(μg/L或μg/kg)

10

5

1

0.5

0.1

0.01

最大允許相對影響率/

%

20

25

30

35

40

50

10.2.3 當樣品空白引起的相對偏差小于表2最大允許相對影響率時,樣品的檢測結果扣除樣品空白作為樣品的最終檢測結果。

10.2.4 當樣品空白引起的相對偏差大于表2最大允許相對影響率時,樣品的檢測結果無效,應重新進行樣品采集和檢測。

6.10.3 10.3 尿液樣品的檢測結果的處理

尿液樣品的檢測結果的處理應依據職業接觸生物限值的相關規定,按照下列公式進行結果校正,按式(7)~式(9)計算。

10.3.1 尿肌酐校正:

捕獲.PNG

式中:

c1——校正后濃度;

c0——校正前濃度;

cr肌酐含量。

10.3.2 尿比重校正:

捕獲.PNG

式中:

c1——校正后濃度;

c——校正前濃度;

d——尿液比重。

10.3.3 尿總含量校正:

捕獲.PNG

式中:

c1——校正后結果;

c0——校正前濃度;

V——24h尿液總體積。

6.10.4 10.4 數據統計

10.4.1 實驗室內樣品重復或平行檢測數據,依據格拉布斯法或狄克遜法刪除異常值;樣品重復或平行檢測的檢測結果應取算術平均值。

10.4.2 當樣品的檢測結果低于方法定量下限時,應報低于方法定量下限,并標注方法定量下限。當樣品的檢測結果低于方法檢出限時,應報未檢出或低于檢出限,并標注方法檢出限。

10.4.3 樣品的檢測結果應按照職業接觸生物限值的單位進行表述。

10.4.4 結果報告應包含樣品性狀、溯源標準、檢測儀器、校準曲線相關系數結果、樣品空白結果、質量控制情況、平行樣檢測情況和樣品檢測結果等內容。

7 附錄

7.1 附錄A(規范性附錄)血、尿液樣品的采集方法

7.1.1 A.1 采樣前準備

A.1.1 應根據采樣的目的制定采樣計劃(或方案),采樣計劃(或方案)應包括人員分工、實施時間、采樣用容器的要求和數目等。

A.1.2 應對采樣用同批次采樣容器(采血管、血液儲存管、尿液儲存容器等)和用品(針、溶液、棉簽、尿杯等)按照5%~10%的比例進行抽檢,確定其待測物濃度(或含量)檢測結果應低于方法定量下限。 A.1.3 需要低溫儲存的容器,應進行低溫冷凍實驗和驗證

7.1.2 A.2 人員要求

7.1.2.1 A.2.1 采樣人員

A.2.1.1 血液樣品應由培訓后的護士實施。

A.2.1.2 尿液樣品采集和樣品分裝人員應經過培訓,熟悉采樣程序

A.2.1.3 采樣人員采樣時應戴工作帽、無粉乳膠手套和口罩。

A.2.1.4 分裝人員應戴應戴工作帽、無粉乳膠手套、口罩和防護眼鏡。

7.1.2.2 A.2.2 采樣對象

采集前應對被采集對象進行培訓,說明樣品采集的重要性和注意事項。采樣對象應脫離工作場所,洗凈手和采樣部位,有條件的要在洗浴后進行。

7.1.3 A.3 環境要求

生物樣品采集應在干凈無污染的室內場所進行采樣,避免待測物的污染,分裝地點應清潔無污染,禁止非專業人員進入。

7.1.4 A.4 采樣容器要求

A.4.1 根據采集全血血漿血清的不同要求分別選用抗凝或不抗凝的采血管。檢測金屬或類金屬元素的采血管可根據待測物選擇肝素鋰或肝素鈉抗凝劑的采血管。采樣容器容積應大于檢測要求使用量,且易于分裝移出。

A.4.2 收集尿液的容器可采用聚氯乙烯塑料容器。

A.4.3 采樣用的容器應具有唯一性編號,編號區域不得被覆蓋,不得涂寫,保持編號清晰完整。

7.1.5 A.5 樣品采集

7.1.5.1 A.5.1 基本要求

樣品采集應在規定的時間內進行,樣品采集時應核對采樣對象姓名與編號后實施,采樣的同時應記錄樣品的信息

7.1.5.2 A.5.2 血液采集

A.5.2.1 采血部位先進行清洗然后使用不含待測物的消毒劑進行消毒。使用合格的一次性采血針,采集>2ml靜脈血于采血管中,采血后用干棉球壓迫傷口。

A.5.2.2 采集全血樣品時,將大于2 mL的血液采集到抗凝管,搖晃使血液與抗凝劑混勻,避免有凝固體形成。

A.5.2.3 采集血漿樣品時,將大于2 mL的血液采集到抗凝管,輕輕搖晃使血液與抗凝劑混勻,不要猛力振搖,避免溶血,待血漿析出后,使用離心分離出血漿,并進行轉移。己溶血的樣品不再進行血漿分離。

A.5.2.4 采集血清樣品時,將大于2 mL的血液采集到無抗凝管或促凝管中,待血液凝固血清析出后,使用離心機將血漿分離并轉移。己溶血的樣品不再進行血清分離。

7.1.5.3 A.5.3 一塊次性尿液采集

用一次性收尿杯,收集中段尿液,并轉移至專用的容器中,尿液體積應>50 mL;采集后的尿液樣品應立即檢測比重(具體參見附錄B),對樣品進行符合性檢驗;當尿比重檢測結果在1.010~1.030范圍內,或肌酐檢測結果在0.3 g/L~3.0 g/L范圍內,尿液樣品有效。采集的尿液樣品按照職業衛生生物接觸限值的要求,檢測肌酐后再進行其他防腐或防吸附處理。

7.1.5.4 A.5.4 全日尿液(24 h尿)采集

在采集開始時間,排空體內膀胱里的尿液棄去,采集24 h內產生的所有尿液,直至第二天同一個時間體內膀胱里的尿液,并收集到專用容器中。將全部尿液混合均勻測量總體積后進行相應的檢測。

7.1.5.5 A.5.5 樣品空白

在樣品采集的過程中,同時制備3套樣品空白;血液樣品空白為用采血針模擬采集去離子水加入采血管中,尿液樣品空白為模擬采集去離子水加入尿液容器中,并與樣品同時運輸和儲存。

7.1.6 A.6 注意事項

當待測物為易揮發有機化合物時,樣品應基本充滿容器;尿液應在檢測比重或肌酐后再按照標準方法要求加入防腐劑。當日樣品采集完畢后應及時核對樣品有關信息并檢查樣品性狀,如有差錯,及時查找原因并采取相關措施。

7.2 附錄B(資料性附錄)尿比重的折射計檢測方法

7.2.1 B.1 原理

尿折射率和尿比重具有較好的相關性,通過檢測尿液相對折射率,計算尿液的比重。

7.2.2 B.2 儀器

a)  折射計:校準合格;

b)  測定范圍:1.000~1.060;具自動溫度補償功能

c)  分辨率:0.001;

d)  測量準確度:±0.0010。

7.2.3 B.3 分析步驟

7.2.3.1 B.3.1 儀器調整

開啟溫度補償功能,用校正液對儀器進行校正。

7.2.3.2 B.3.2 樣品測定

用滴管取1滴混勻后的尿液置于測試池中,或將折射計的測試端置于混勻后的尿液中,待示數穩定后記錄示數。

7.2.4 B.4 說明

樣品測試過程中注意防止交叉污染和影響;采用手持式折射計測試時,測試端置于尿液時應避免碰到容器的壁。

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