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GB 8270—2014 食品安全國家標準 食品添加劑 甜菊糖苷

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1 拼音

GB 8270—2014 shí pǐn ān quán guó jiā biāo zhǔn shí pǐn tiān jiā jì tián jú táng gān

中華人民共和國國家標準 GB 8270—2014《食品安全國家標準 食品添加劑 甜菊糖苷》由中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會于2015年01月28日發布,自2015年07月28日起實施,代替GB 8270—1999《食品添加劑 甜菊糖甙》。

2 前言

本標準代替GB 8270—1999《食品添加劑 甜菊糖甙》。

本標準與GB 8270—1999相比,主要變化如下:

——標準名稱修改為“食品安全國家標準 食品添加劑 甜菊糖苷”;

——修改了標準結構

——修改了結構式分子式相對分子質量相關內容;

——取消了理化指標中的等級要求,統一指標;

——修改了鑒別試驗;

——修改了理化指標中甜菊糖苷含量、灼燒殘渣干燥減量指標;

——刪除了理化指標中甜度、比旋光度、比吸光度和重金屬指標;

——增加了鉛、甲醇乙醇指標。

食品安全國家標準

食品添加劑 甜菊糖苷

3 1 范圍

本標準適用于以甜葉菊(Stevia Rebaudiana Bertoni)干葉為原料,經提取、精制而得的食品添加劑甜菊糖苷。主要糖苷為甜菊苷和瑞鮑迪苷A,其他已知糖苷包括瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷及甜菊雙糖苷。

4 2 分子式、結構式和相對分子質量

4.1 2.1 主要糖苷的分子式

甜菊苷:C38H60O18

瑞鮑迪苷A:C44H70O23

4.2 2.2 9種糖苷的結構式

捕獲.JPG

9種糖苷的壓合物名稱、R1位取代基和R2位取代基見表1。

表1 9種糖苷的壓合物名稱、R1位取代基和R2位取代基

化合物名稱

中文名稱

英文名稱

R1位取代基

R2位取代基

甜菊苷

stcvioside

β-Glc

β-Glc-β-Glc(2→1)

瑞鮑迪苷A

rebaudioside A

β-Glc

β-Glc-β-Glc(2→1)

β-Glc(3→1)

瑞鮑迪苷B

rcbaudioside B

H

β-Glc-β-Glc(2→1)

β-Glc(3→1)

瑞鮑迪苷C

rebaudioside C

β-Glc

β-Glc-α-Rha(2→1)

β-Glc(3→1)

瑞鮑迪苷D

rcbaudioside D

β-Glc-β-Glc(2→1)

β-Glc-β-Glc(2→1)

β-Glc(3→1)

瑞鮑迪苷F

rcbaudioside F

β-Glc

β-Glc-β-Xyl(2→1)

β-Glc(3→1)

表1(續)

化合物名稱

中文名稱

英文名稱

R1位取代基

R2位取代基

杜克苷A

dulcoside A

β-Glc

β-Glc-α-Rha(2→1)

甜茶苷

rubusoside

β-Glc

β-Glc

甜菊雙糖苷

stcviolbioside

H

β-Glc-β-Glc(2→1)

4.3 2.3 主要糖苷的相對分子質量

甜菊苷:804.88(按2007年國際相對原子質量

瑞鮑迪苷A:967.03(按2007年國際相對原子質量)

5 3 技術要求

5.1 3.1 感官要求

應符合表2的規定

表2 感官要求

項目

要求

檢驗方法

色澤

白色至淺黃色

取適量試樣置于清潔、干燥的白瓷盤中,在自

狀態

粉末或晶體

然光線下觀察其色澤和狀態

5.2 3.2 理化指標

應符合表3的規定。

表3理化指標

項目

指標

檢驗方法

甜菊糖苷含量(以干基計,w)/%   ≥

85

附錄A中A.4

灼燒殘渣(w)/%   ≤

1

GB 5009.4

干燥減量(w)/%   ≤

6

GB 5009.3直接干燥法a

鉛(Pb)/(mg/kg)

1

GB 5009.12

總砷(以As計)/(mg/kg)   ≤

1

GB 5009.11

甲醇/(mg/kg)   ≤

200

乙醇/(mg/kg)   ≤

5000

A.4

a 干燥溫度和時間分別為105℃±2℃和2h。

注:商品化的甜菊糖苷產品應以符合本標準的甜菊糖苷為原料,可添加用于標準化日的的淀粉等食品原料。

6 附錄A 檢驗方法

6.1 A.1 一般規定

本標準所用試劑和水,在沒有注明其他要求時,均指分析純試劑和GB/T 6682中規定的三級水。試驗中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、制劑及制品,在沒有注明其他要求時,均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的規定制備。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時,均指水溶液。

6.2 A.2 鑒別試驗

A.2.1 甜菊苷和瑞鮑迪苷A試驗

在甜菊糖苷含量試驗中,試樣溶液的液相色譜圖中甜菊苷和瑞鮑迪苷A兩個主峰應與混合標準溶液的色譜圖相對應。

A.2.2 試樣溶液的pH

稱取1g試樣,溶于100 mL水中,用酸度計測定試樣溶液的pH在4.5~7.0。

6.3 A.3 甜菊糖苷含量的測定

6.3.1 A.3.1 方法一

A.3.1.1 試劑和材料

A.3.1.1.1 乙腈:色譜純。

A.3.1.1.2 磷酸二氫鈉:色譜純。

A.3.1.1.3 磷酸:色譜純。

A.3.1.1.4 水:GB/T 6682—2008中規定的一級水。

A.3.1.1.5 乙腈水溶液:乙腈和水的體積比為30:70。

A.3.1.1.6 磷酸鈉緩沖液(pH 2.6):稱取1.20 g磷酸二氫鈉(NaH2PO4),溶于800 mL水中,用磷酸調節pH至2.6。

A.3.1.1.7 甜菊苷標準品:甜菊苷含量(質量分數,以干基計)≥99.0%。

A.3.1.1.8 瑞鮑迪苷A標準品:瑞鮑迪苷A含量(質量分數,以干基計)≥99.0%。

A.3.1.1.9 其他7種糖苷標準品:瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷和甜菊雙糖苷。

6.3.1.1 A.3.1.2 儀器和設備

高效液相色譜儀:配備紫外檢測器,或其他等效的檢測器。

6.3.1.2 A.3.1.3 參考色譜條件

A.3.1.3.1 色譜柱:C18反相色譜柱,250 mm×4.6 mm,粒徑5μm;或其他等效的色譜柱。

A.3.1.3.2 流動相:乙腈:磷酸鈉緩沖液=32:68。

A.3.1.3.3 流動相流速:1.0 mL/min。

A.3.1.3.4 檢測波長:210 nm。

A.3.1.3.5 進樣量:2μL~10μL。

A.3.1.3.6 柱溫:40℃。

6.3.1.3 A.3.1.4 分析步驟

A.3.1.4.1 混合標準品溶液的制備

分別稱取適量甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊雙糖苷標準品,置于同一個容量瓶中,用乙腈水溶液完全溶解后定容,得到混合標準品溶液。混合標準品溶液用于確定9種糖苷的相對保留時間。

A.3.1.4.2 標準溶液的制備

分別稱取0.05 g甜菊苷標準品和瑞鮑迪苷A標準品,精確至0.001 g,分別置于50 mL的容量瓶中,用乙腈水溶液溶解后稀釋至刻度,得到甜菊苷標準溶液和瑞鮑迪苷A標準溶液。

A.3.1.4.3 試樣溶液的制備

稱取0.05 g~0.1 g試樣,精確至0.001 g,置于50 mL的容量瓶中,用乙腈水溶液溶解后稀釋至刻度,得到試樣溶液。

6.3.1.4 A.3.1.5 測定

在A.3.1.3參考色譜條件下,分別對混合標準品溶液、標準溶液和試樣溶液進行色譜分析。將試樣溶液的色譜圖與混合標準品溶液的色譜圖相比較,以確定試樣溶液色譜圖中各組分對應的峰。記錄試樣溶液色譜圖中甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊雙糖苷的峰面積及標準溶液色譜圖中甜菊苷和瑞鮑迪苷A的峰面積。

6.3.1.5 A.3.1.6 結果計算

瑞鮑迪苷A含量(以干基計)的質量分數wa按式(A.1)計算:

捕獲.JPG

式中:

mR——瑞鮑迪苷A標準溶液中瑞鮑迪苷A的質量(以干基計),單位為毫克(mg);

m——試樣溶液中試樣的質量(以干基計),單位為毫克(mg);

Aa——試樣溶液色譜圖中瑞鮑迪苷A的峰面積值;

AR——瑞鮑迪苷A標準溶液色譜圖中瑞鮑迪苷A的峰面積值。

其他8種糖苷含量(以干基計)的質量分數wi按式(A.2)計算:

捕獲.JPG

式中:

i——s、b、c、d、f、da、ru、sb,分別對應甜菊苷、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊雙糖苷;

ms——甜菊苷標準溶液中甜菊苷的質量(以干基計),單位為毫克(mg);

m——試樣溶液中試樣的質量(以干基計),單位為毫克(mg);

fi——i組分與甜菊苷的式量比值:1.00(甜菊苷)、1.00(瑞鮑迪苷B)、1.18(瑞鮑迪苷C)、1.40(瑞鮑迪苷D)、1.16(瑞鮑迪苷F)、0.98(杜克苷A)、0.80(甜茶苷)、0.80(甜菊雙糖苷);

Ai——試樣溶液色譜圖中i組分的峰面積值;

As——甜菊苷標準溶液色譜圖中甜菊苷的峰面積值。

由式(A.1)和式(A.2)計算得到9種組分的含量wa、ws、wb、wc、wd、wf、wda、wru和wsb,取各組分含量之和即為試樣中甜菊糖苷含量。

6.3.2 A.3.2 方法二

6.3.2.1 A.3.2.1 試劑和材料

A.3.2.1.1 乙腈:色譜純。

A.3.2.1.2 磷酸二氫鈉:色譜純。

A.3.2.1.3 磷酸:色譜純。

A.3.2.1.4 水:GB/T 6682—2008中規定的一級水。

A.3.2.1.5 乙腈水溶液:乙腈和水的體積比為30:70。

A.3.2.1.6 磷酸鈉緩沖液(pH 2.6):稱取1.20 g磷酸二氫鈉(NaH2PO4),溶于800 mL水中,用磷酸調節pH至2.6,用水稀釋至1000 mL。

A.3.2.1.7 甜菊苷標準品:甜菊苷含量(質量分數,以干基計)≥99.0%。

A.3.2.1.8 其他8種糖苷標準品:瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷和甜菊雙糖苷。

6.3.2.2 A.3.2.2 儀器和設備

同A.3.1.2。

6.3.2.3 A.3.2.3 參考色譜條件

同A.3.1.3。

6.3.2.4 A.3.2.4 分析步驟

A.3.2.4.1 混合標準品溶液的制備

分別稱取適量甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊雙糖苷標準品,置于同一個容量瓶中,用乙腈水溶液完全溶解后定容,得到混合標準品溶液。混合標準品溶液用于確定9種糖苷的相對保留時間。

A.3.2.4.2 標準溶液的制備

稱取0.05 g甜菊苷標準品,精確至0.001 g,置于50 mL的容量瓶中,用乙腈水溶液溶解后稀釋至刻度,得到甜菊苷標準溶液。A.3.2.4.3 試樣溶液的制備稱取0.05 g~0.1 g試樣,精確至0.001 g,置于50 mL的容量瓶中,用乙腈水溶液溶解后稀釋至刻度,得到試樣溶液。

6.3.2.5 A.3.2.5 測定

在A.3.2.3參考色譜條件下,分別對混合標準品溶液、標準溶液和試樣溶液進行色譜分析。將試樣溶液的色譜圖與混合標準品溶液的色譜圖相比較,以確定試樣溶液色譜圖中各組分對應的峰。記錄試樣溶液色譜圖中甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊雙糖苷的峰面積及標準溶液色譜圖中甜菊苷的峰面積。

6.3.2.6 A.3.2.6 結果計算

9種糖苷含量(以干基計)的質量分數wi按式(A.3)計算:

捕獲.JPG

式中:

i——s、a、b、c、d、f、da、ru、sb,分別對應甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊雙糖苷;

ms——甜菊苷標準溶液中甜菊苷的質量(以干基計),單位為毫克(mg);

m——試樣溶液中試樣的質量(以干基計),單位為毫克(mg);

fi——i組分與甜菊苷的式量比值:1.00(甜菊苷)、1.20(瑞鮑迪苷A)、1.00(瑞鮑迪苷B)、1.18(瑞鮑迪苷C)、1.40(瑞鮑迪苷D)、1.16(瑞鮑迪苷F)、0.98(杜克苷A)、0.80(甜茶苷)、0.80(甜菊雙糖苷);

Ai——試樣溶液色譜圖中i組分的峰面積值;

As——甜菊苷標準溶液色譜圖中甜菊苷的峰面積值。

由式(A.3)計算得到9種組分的含量訓ws、wa、wb、wc、wd、wf、wda、wru和wsb,取各組分含量之和即為試樣中甜菊糖苷含量。

6.4 A.4 甲醇和乙醇的測定

6.4.1 A.4.1 試劑和材料

A.4.1.1 甲醇:色譜純。

A.4.1.2 乙醇:色譜純。

A.4.1.3 水:一級水。

6.4.2 A.4.2 儀器和設備

氣相色譜儀:配有氫火焰離子化檢測器(FID)和頂空進樣器。

6.4.3 A.4.3 參考色譜條件

A.4.3.1 色譜柱:鍵合聚乙二醇熔融石英毛細管柱(柱長為30 m,柱內徑為0.25 mm,膜厚度為0.25 μm),或其他等效的色譜柱。

A.4.3.2 載氣:氮氣(純度≥99.99%)。

A.4.3.3 載氣流量:5.0 mL/min。

A.4.3.4 柱溫:40℃保持5 min,以10℃/min升溫至120℃,保持2 min,最后以16℃/min升溫至200℃,保持5 min。

A.4.3.5 進樣口溫度:200℃。

A.4.3.6 檢測器溫度:250℃。

A.4.3.7 進樣體積:1 mL。

A.4.3.8 分流比:1:50。

6.4.4 A.4.4 參考頂空條件

A.4.4.1 頂空瓶溫度:80℃。

A.4.4.2 頂空瓶平衡時間:30 min。

6.4.5 A.4.5 分析步驟

6.4.5.1 A.4.5.1 空白溶液的制備

移取2 mL水,置于頂空瓶中,迅速壓緊瓶蓋,備用。

6.4.5.2 A.4.5.2 標準溶液的制備

A.4.5.2.1 甲醇標準溶液的制備

稱取0.1 g甲醇,精確至0.001 g,用水稀釋后轉移至一個1000 mL的容量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得100 mg/L的甲醇標準儲備溶液。將該溶液配制成一系列濃度為50 mg/L、20 mg/L、10 mg/L、5 mg/L和2.5 mg/L的甲醇標準溶液。移取上述系列濃度溶液各2 mL,分別置于頂空瓶中,迅速壓緊瓶蓋,備用。

A.4.5.2.2 乙醇標準溶液的制備

稱取0.1 g乙醇,精確至0.001 g,用水稀釋后轉移至一個100 mL的容量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得1000 mg/L的乙醇標準儲備溶液。將該溶液配制成一系列濃度為750 mg/L、500 mg/L、200 mg/L、100 mg/L和50 mg/L的乙醇標準溶液。移取上述系列濃度溶液各2 mL,分別置于頂空瓶中,迅速壓緊瓶蓋,備用。

6.4.5.3 A.4.5.3 試樣溶液的制備

稱取1.0 g試樣,精確至0.001 g,用水溶解后轉移至一個10 mL的容量瓶中,在室溫下超聲處理約3 min,加水稀釋至刻度,搖勻。移取該溶液2 mL置于頂空瓶中,迅速壓緊瓶蓋,備用。

6.4.6 A.4.6 測定

在參考操作條件(A.4.3和A.4.4)下,分別對空白溶液、標準系列溶液和試樣溶液進行測定,記錄甲醇或乙醇的峰面積值。以標準系列溶液色譜圖中甲醇或乙醇的峰面積值為y軸,以對應溶劑濃度(mg/L)為X軸,繪制標準曲線,得到甲醇標準曲線或乙醇標準曲線。根據試樣溶液色譜圖中甲醇或乙醇的峰面積值,從標準曲線求得試樣溶液中甲醇或乙醇的濃度(mg/L)。

6.4.7 A.4.7 結果計算

甲醇或乙醇含量w以毫克每千克(mg/kg)計,按式(A.4)計算:

捕獲.JPG

式中:

c——從標準曲線求得的試樣溶液中甲醇或乙醇的濃度,單位為毫克每升(mg/L);

V——試樣溶液的體積,單位為毫升(mL);

m——試樣的質量,單位為克(g)。

7 附錄B 混合標準品溶液的參考色譜圖

混合標準品溶液的參考色譜圖見圖B.1。

捕獲.JPG

注:所測混合標準品溶液中,瑞鮑迪苷F的濃度約為0.1 mg/mL,其余組分的濃度為0.5 mg/mL。

圖B.1 混合標準品溶液參考色譜示意圖

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    2020/9/28 2:58:47 | #0
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